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以雌性昆明种小鼠为试验动物，经PMSG-hCG超数排卵后，收集受精卵，进行体外培养。当胚胎发育至早期囊胚时，按照下列方式处理:(1)将体外培养至早期囊胚的小鼠胚胎分别施以温和热应激(39℃，2h)和强烈热应激处理(41℃，2h)，热应激结束后在37℃下继续培养;对照组在37℃下连续培养。在体视显微镜下观察热应激后24h时早期囊胚发育到扩张囊胚的比率和热应激后48h时早期囊胚发育到孵化囊胚的比率;利用早期胚胎总细胞计数法，统计热应激后24h时早期囊胚发育到扩张囊胚的平均总细胞数及热应激后48h时早期囊胚发育到孵化囊胚的平均总细胞数。(2)将体外培养至早期囊胚的小鼠胚胎分别施以温和热应激(39℃，2h)和强烈热应激(41℃，2h)处理，分别在热应激后0h和2h时，收集胚胎，制作超薄切片;对照纽胚胎处理方式同热应激组。利用电子显微镜技术，观察不同强度热应激组和对照组胚胎及热应激后胚胎不经恢复和恢复2h时的超微结构变化。试验结果如下:
1.热应激对小鼠早期囊胚发育能力的影响
体外培养的小鼠早期囊胚在41℃、6％CO2条件下热应激处理2h，小鼠早期囊胚发育到扩张囊胚（63.3±3.6％）和孵化囊胚（49.4±9.3％）的比率显著降低(P＜0.05)，而在39℃、5.5％CO2条件下热应激处理2h的小鼠早期囊胚发育到扩张囊胚（80.8±6.4％）和孵化囊胚（79.7±5.6％）的比率与对照组小鼠早期囊胚发育到扩张囊胚（81.7±6.5％）和孵化囊胚（77.2±5.0％）的比率差异不显著(P＞0.05)。与对照组小鼠早期囊胚发育到扩张囊胚的平均总细胞数（57.11±1.7）相比，39℃热应激组（49.89±1.3）和41℃热应激组（42.22±2.0）小鼠早期囊胚发育到扩张囊胚的平均总细胞数均显著降低(P＜0.05)，但39℃热应激组（71.27±0.5）和41℃热应激组（71.89±1.8）小鼠早期囊胚发育到孵化囊胚的平均总细胞数与对照组（73.09±0.6）小鼠早期囊胚发育到孵化囊胚的平均总细胞教之间差异不显著(P＞0.05)。
2.热应激对小鼠早期囊胚超微结构形态的影响
在37℃正常培养的小鼠早期囊胚中，胞浆含有丰富的线粒体和内质网及少量的溶酶体;粗面内质网上有大量的颗粒状的核糖体附着;细胞核内以常染色质为主，核仁大而松散;细胞连接紧密、结构完整;卵周隙狭窄。
39℃热应激组小鼠早期囊胚的线粒体发生轻微肿胀，内质网略有扩张，部分核糖体从粗面内质网上脱落;核周间隙稍有增大。经37℃恢复培养2h，上述异常细胞器已修复。
41℃热应激组小鼠早期囊胚线粒体高度肿胀，粗面内质网上的核糖体脱落严重，滑面内质网和溶酶体增多;卵周间隙和核周间隙明显增大;核仁的纤维部和颗粒部分离，异染色质增多;桥粒连接结构被破坏，胞浆出现异常物质。热应激后经37℃恢复培养2h，损伤的细胞器没有得到修复。
以上结果说明，39℃温和热应激2h未对小鼠早期囊胚的发育能力和细胞器超微结构形态产生明显的影响。41℃强烈热应激2h对小鼠早期囊胚发育具有明显的抑制作用，并且损伤的胚胎难以从热应激中恢复。