目的:胶质瘤作为最常见的颅内原发恶性肿瘤,采用手术、放疗、化疗等传统治疗方法,仍难以根治,几乎所有病人均复发,而且位于重要功能区的肿瘤不适合手术切除,病人中位生存期(MST)仅约1年,预后差。为改善治疗效果,人们进行了许多有益的探索,尝试一些新的治疗方法,以期获得更佳效果。作为已知的人体内抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞—树突状细胞(dendritic cell,DC),现已具备了进行体外分离、扩增与培养的成熟技术,各种形式的DC肿瘤疫苗的研究已成为当前国际上肿瘤治疗的一大热点。本研究旨在培育DC/C6融合瘤苗,对C6系胶质瘤进行免疫预防与治疗,以期为DC疫苗在胶质瘤的的临床应用方面提供更加详实的理论依据,力求为胶质瘤免疫预防和治疗提供一条新途径。 方法: 1.DC的分离、培养、扩增与鉴定:采集大鼠骨髓细胞,通过梯度离心方法获得骨髓单核细胞,收集单核细胞中的非黏附细胞,加入IL-4、GM-CSF两种细胞因子使骨髓前体细胞分化为DC,从形态学、表面标记物、功能学方面对DC进行鉴定。 2.DC/C6融合瘤苗的制备及生物学特性的研究:应用聚乙二醇法(PEG)进行C6细胞和DC的融合,对融合细胞混合体进行OX62—RPE标记,应用流式细胞仪分选OX62~+细胞,根据DC/C6融合瘤苗黏附性的不同分离纯化融合瘤苗。对融合瘤苗进行GFAP—FITC免疫荧光检查,利用DC/C6融合瘤苗进行MLR和CTL实验,对融合瘤苗进行功能学鉴定;同时对融合瘤苗的致瘤性进行检测。 3.DC/C6融合瘤苗免疫预防和治疗C6胶质瘤的实验研究:免疫保护