【摘 要】
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急性白血病是儿童最常见的恶性肿瘤,其中急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphocytic Leukemia,ALL)约占80%,目前小儿ALL的发病机理尚不十分清楚。随着分子生物学技术的应用,寻找
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急性白血病是儿童最常见的恶性肿瘤,其中急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphocytic Leukemia,ALL)约占80%,目前小儿ALL的发病机理尚不十分清楚。随着分子生物学技术的应用,寻找小儿ALL差异基因表达谱已成为发现、阐明小儿ALL机制的重要手段。本课题组应用抑制性消减杂交( suppression subtractive hybridization,SSH)技术,成功分离出一组小儿ALL白血病差异表达基因,其中TIG2 (Tazarotene-induced gene 2)基因低表达甚至沉默。为进一步探讨TIG2基因与小儿ALL的发病关系,我们在体外成功地构建了TIG2真核细胞表达载体pGL3-TIG2,转染ALL细胞(c-ALL、pre-B ALL、B-ALL和T-ALL),探讨了TIG2基因的表达对白血病细胞的影响。研究结果显示:构建完成的真核表达重组质粒pGL3-TIG2,经酶切和DNA测序与GenBank中的人TIG2 cDNA序列一致;Western blotting观察到转染重组质粒的ALL细胞中有TIG2蛋白的表达;转染pGL3-TIG2质粒的ALL细胞增殖能力明显下降(P<0.01)。结论:本实验成功构建了pGL3-TIG2真核表达质粒,过表达的TIG2可抑制ALL细胞增殖,促进细胞凋亡,为进一步研究TIG2基因在白血病细胞中作用提供了基础。
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