松材线虫病（Pine Wilt Disease,PWD）是世界性的检疫性病害,给亚洲和欧洲多个国家和地区造成了严重的生态破坏和经济损失。松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）在野外扩散型三龄幼虫（JⅢ）阶段形成超大脂滴,储存脂肪进入滞育期;在媒介昆虫体内的扩散型4龄幼虫（JⅣ）无法取食,依靠储存于脂滴的脂肪来生存和扩散传播,且抗逆性强,寿命延长。因此,厘清松材线虫扩散型幼虫形成过程中脂肪酸组分和脂滴的动态变化,对揭示松材线虫扩散传播机制和开发特异性防控措施具有重要意义。本文通过低温、外源添加脂肪酸、干扰转录因子daf-12基因和抑制TOR信号通路等四种处理,解析松材线虫不同发育阶段脂肪酸组分、含量变化及脂滴动态变化规律。主要研究结果如下:1、松材线虫在不同发育阶段,脂肪酸种类相同,相对含量较相似,其中多不饱和脂肪酸含量最高,分别占J2期、J3期、J4期和成虫期总脂肪酸含量的59.80%,55.68%,63.38%和62.08%。在J2期,相对含量最高的脂肪酸是花生四烯酸,占27.15%,在J3期、J4期和成虫期,相对含量最高的是亚油酸,分别占各龄期的27.00%,36.20%和36.43%。低温可以促进各个龄期的松材线虫发生脂滴融合,而饱和脂肪酸相对含量保持在31.0%左右,约7.5%的单不饱和脂肪酸脱氢转化成多不饱和脂肪酸,脂肪酸的不饱和程度增加。2、外源添加油酸使松材线虫体内产生直径超过10μm的超大脂滴,使松材线虫的棕榈酸含量提高,亚油酸含量降低。外源添加棕榈酸和亚油酸诱导松材线虫脂滴增大近一倍,并主要改变了棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸的相对含量。松材线虫的daf-12基因和SCD基因在外源脂肪酸诱导下显示出不同程度的转录水平上调。3、与脂肪酸代谢和扩散型幼虫形成密切相关的转录因子daf-12基因在松材线虫不同发育阶段均有表达,在繁殖期中表达量呈先升后降的趋势,表达部位广泛。松材线虫的daf-12基因和SCD基因与低温响应过程密切相关,它们均能对低温环境信号做出不同程度上调的转录响应。Daf-12（RNAi）在常温下寿命缩短,但低温下寿命未发生变化。各个龄期松材线虫经过daf-12基因干扰后,脂滴都显著增大,成虫干扰后脂滴直径从4μm扩大到8μm,表明daf-12有抑制脂滴融合的功能。J2、J3和成虫在干扰后各个脂肪酸组分、多不饱和脂肪酸和总脂肪酸都有不同程度的增加,但J4期总脂肪酸含量基本保存不变,多不饱和脂肪酸减少。4、使用TOR信号通路抑制剂雷帕霉素处理松材线虫,通过脂滴染色发现可促进松材线虫脂肪积累,脂滴增大,气相色谱-质谱法（Gas chromatograph-mass spectrometer,GC-MS）结果显示雷帕霉素提高了松材线虫的多不饱和脂肪酸组成比例。松材线虫繁殖型幼虫转型发育为扩散型幼虫是实现松材线虫病扩散传播与流行的关键环节,上述研究结果明确了低温、外源脂肪酸、daf-12基因和雷帕霉素四种因素均对松材线虫的脂肪存储和脂滴增大、融合具有促进作用,对扩散型幼虫的形成和扩散传播具有重要作用。研究结果为深入解析松材线虫扩散型幼虫形成机制提供了理论支撑,为开发设计特异性阻断扩散型幼虫形成的防控措施提供了研究思路。