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目的:食管鳞癌是预后最严重的恶性肿瘤之一,发病率及死亡率均居全球恶性肿瘤前十。淋巴结转移是食管鳞癌的主要转移方式,术后淋巴结转移及复发是目前手术治疗失败的主要原因。食管鳞癌的转移规律是临床医生备受关注的问题。1.本研究通过免疫组织化学染色,探索小鼠食管淋巴管的分布以及与人食管中淋巴管分布的差异性。2.本研究通过ProxTom小鼠,在激光共聚焦显微镜下观察小鼠食管的淋巴管分布。3.本研究描述食管鳞癌患者转移淋巴结内肿瘤细胞与血管的位置关系。方法:1.运用免疫组织化学染色,检测PROX1以及LYVE1在野生型小鼠食管的表达。2.运用免疫组织化学染色,检测PROX1以及LYVE1在人食管正常组织的表达。3.采用聚合酶链(polymerase chain reaction,PCR)进行小鼠基因型鉴定,确定ProxTom小鼠的PROX1-tdToamto基因型。4.制备食管冰冻切片,DAPI染色后,运用激光共聚焦显微镜观察ProxTom小鼠食管的淋巴管分布。5.制备食管鳞癌患者转移淋巴结石蜡切片,进行免疫组织化学CD31与pan-Cytokeratin双染,观察转移淋巴结内血管与肿瘤细胞的位置关系。结果:1.免疫组织化学检测PROX1、LYVE1的表达,显示淋巴管的分布,发现野生型小鼠食管与人正常食管的淋巴管分布状态相似。2.LYVE1+淋巴管在10天龄小鼠和成年小鼠的食管中分布状态相似。3.LYVE1免疫组织化学染色发现:小鼠食管淋巴管主要分布在肌层。小鼠食管淋巴管密度、形态以及位置与人正常食管淋巴管相似。4.PCR证实ProxTom小鼠携带PROX1-tdTomato转基因。5.ProxTom小鼠新鲜食管在激光共聚焦显微镜下观察结果:ProxTom小鼠食管与野生型小鼠食管淋巴管的分布一致。ProxTom小鼠食管的淋巴管呈网状分布。6.食管鳞癌患者转移淋巴结进行免疫组织化学CD31与pan-Cytokeratin双染提示,肿瘤细胞可进入淋巴结内血管,进入血液循环,发生远处器官转移。结论:1.小鼠食管淋巴管主要分布在食管肌层,呈网状分布,与人正常食管内淋巴管在位置、密度与形态上相似。2.食管鳞癌细胞可以通过转移淋巴结内的血管发生血行转移。