杜仲绿原酸的分离纯化、结构鉴定及微胶囊化的研究

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杜仲是我国的传统的经济作物,其药用价值一直备受关注。作为天然的绿色植物,具有利胆、降压、抗菌、消炎及升高白细胞等药理作用,是一种重要的可再生资源。其中绿原酸(咖啡酸和奎尼酸缩合的缩酚酸)是杜仲中重要的活性成分。本研究课题是对杜仲叶中的绿原酸进行提取、分离纯化、结构鉴定、微胶囊及杜仲茶酸奶功能性酸奶的研究。本文以湖北老龙洞杜仲开发有限公司提供的杜仲叶为主要原料,利用现代化的分离手段和新型的微胶囊化技术对杜仲叶中的绿原酸进行研究。通过酵母细胞壁包埋绿原酸可提高绿原酸的稳定性,为绿原酸类保健品的贮藏提供有利的方案。同时,对杜仲茶酸奶的研制工艺进行优化,研制出新型的保健型杜仲茶酸奶。本实验所得主要结果如下:1杜仲绿原酸的提取以湖北襄樊地区的杜仲叶为原料,采用乙醇超声提取杜仲叶中的绿原酸。通过单因素实验,正交实验确定最佳提取条件,研究表明,在乙醇浓度为60%、提取温度60℃、料液比为1:20、提取液的pH值为3的条件下,杜仲叶中绿原酸的提取率达到最大,为6.1%。2杜仲绿原酸的分离纯化及结构鉴定对NKA-2、NKA-9、AB-8、XD-2、D14、D16、SIPI-DA201七种大孔树脂进行筛选,NKA-2型大孔树脂对绿原酸有较好的选择性,其吸附率和解吸率分别为99.67%和62.8%。盐酸调整洗脱液的pH为3,洗脱液的浓度为30%时,洗脱效果最好。澄清后的绿原酸粗提液经乙酸乙酯萃取除去黄酮,再用NKA-2型树脂进行梯度洗脱,可得到纯度为76.3%的绿原酸。HPLC-MS分析表明,绿原酸是咖啡酸和奎尼酸缩合的缩酚酸。3杜仲提取物和绿原酸纯品抗氧化活性的对比分别采用K3[Fe(CN)6]、Fenton法、邻苯三酚自氧法测定杜仲提取物和绿原酸纯品的还原力、对·OH的清除率,对超氧阴离子的清除率,并以Vc最参照。结果表明:杜仲提取物的各项抗氧化性能均高于绿原酸纯品,而Vc对超氧阴离子的清除能力最强可达到100%。4绿原酸酵母细胞微胶囊化的研究采用酿酒酵母的细胞壁包埋水溶性的绿原酸,通过正交试验考察包埋温度、包埋时间、芯材比等因素对绿原酸微胶囊包埋率的影响。结果表明,在包埋温度40℃、包埋时间6h、芯材比为3:1(g/g),以6mL蒸馏水为包埋介质的组合条件下,包埋率最大为18.9%。微胶囊红外光谱分析发现绿原酸的特征官能团的振动消失;荧光显微镜观察显示微胶囊呈球形,微胶囊内的绿原酸自发明亮的荧光;高效液相色谱定性分析显示,绿原酸包埋前后保留时间及紫外扫描图谱相一致。研究结果表明绿原酸成功的包埋到酵母细胞壁内,且在包埋过程中没有发生任何化学变化。5杜仲茶酸奶的研制及茶粉对酸奶品质的影响以牛乳和杜仲茶粉为主要原料,经乳酸菌发酵后,制成茶粉与酸奶结合的功能性新型酸奶。通过正交实验考察了杜仲茶粉添加量、加糖量、接种量和稳定剂的添加量对酸奶品质的影响。结果表明,当杜仲茶粉添加量0.15%、白砂糖添加量6%、发酵剂接种量8%、稳定剂添加量0.1%时,酸奶色泽、香气、滋味及组织状态具佳。杜仲茶粉和杜仲绿原酸纯品均能影响酸奶的发酵品质,实验结果表明成分复杂的杜仲茶粉能够促进乳酸菌的发酵产酸,而纯品绿原酸则有抑制作用;杜仲茶粉的添加对酸奶品质及蛋白质体外消化率无不良影响。
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