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猪圆环病毒(PorcineCircovirus,PCV)是一种最小的动物病毒,有两种血清型,PCV2对猪体有致病性,PCV1却没有。猪群感染PCV2能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)和猪皮炎肾病综合征(Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome,PDNS)等多种疾病及免疫抑制。PCV2的感染在猪群中普遍存在,严重影响养猪业的正常健康发展。猪圆环病毒2型的Cap蛋白为PCV2的主要结构蛋白,包含多个B细胞表位与中和表位,具有良好的抗原性,可以诱导猪体产生保护性免疫应答。PCV2抗体检测技术有ELISA、IPMA和IFA等,其中ELISA抗体检测方法操作方法简单,可同时进行大量血清样品检测。目前商品化的PCV2 ELISA抗体检测试剂盒均是间接ELISA检测方法,对抗原纯度要求较高,容易产生假阳性。本实验室以5H7酶标鼠单抗为基础,建立了 PCV2 Cap蛋白的阻断ELISA抗体检测方法,特异性更好,能更准确的反应血清抗体水平,具有重要研究开发价值。本研究基于PCV2 Cap蛋白的阻断ELISA抗体检测试剂盒制造和检验规程草案,在江苏南农高科技股份有限公司GMP车间制备了 PCV2CapC重组蛋白、酶标单抗、PCV2阴阳性标准血清基础上,制备了 5批猪圆环病毒2型阻断ELISA抗体检测试剂盒,进行了性状检验、无菌检验、敏感性检验和特异性检验,并且与国内的瑞普(保定)生物药业有限公司生产的猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒和韩国金诺公司生产的PCV2 ELISA抗体检测试剂盒进行符合率比较试验。结果表明,制备的5批猪圆环病毒2型阻断ELISA抗体检测试剂盒的性状检验、无菌检验、敏感性检验和特异性检验全部合格。采集了江苏省5个猪场采集598份猪血清用来与国内外的两种试剂盒进行符合率试验,证明该试剂盒与金诺商品试剂盒和瑞普试剂盒符合率分别为93.6%～94.5%和81.8%～84.5%,证明该试剂盒可用于猪群PCV2抗体检测。