【摘 要】
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宫颈癌（CC）作为一种发生于子宫颈部的常见恶性肿瘤,它的发病率居高,在妇科肿瘤中居世界第二位。它对女性健康构成严重威胁,近年来,宫颈癌的发病率和死亡率在全球范围仍呈增加趋势。然而传统的疗法疗效有限,且预后较差。在这种情况下,研究人员一直在寻找新型的抗宫颈癌药物,其中包括具有低毒性和广泛抗癌活性的植物衍生化合物。人参皂苷作为一种天然活性成分,具有抗炎、镇痛、抗衰老等活性,特别是它们的抗癌作用已在多种
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宫颈癌（CC）作为一种发生于子宫颈部的常见恶性肿瘤,它的发病率居高,在妇科肿瘤中居世界第二位。它对女性健康构成严重威胁,近年来,宫颈癌的发病率和死亡率在全球范围仍呈增加趋势。然而传统的疗法疗效有限,且预后较差。在这种情况下,研究人员一直在寻找新型的抗宫颈癌药物,其中包括具有低毒性和广泛抗癌活性的植物衍生化合物。人参皂苷作为一种天然活性成分,具有抗炎、镇痛、抗衰老等活性,特别是它们的抗癌作用已在多种癌细胞中得到证实。本文通过体外细胞实验,对人参皂苷CK抑制宫颈癌He La细胞的机理进行了研究,该结果对人参皂苷类成分作为一种功能性食品成分应用于食品和医药行业具有参考作用。主要研究内容包括:（1）人参皂苷CK诱导宫颈癌He La细胞凋亡和自噬及分子机制。通过MTT实验确定了人参皂苷CK对He La细胞的半抑制浓度(IC50)为45.95μM,细胞周期实验证明将细胞周期的进程阻滞在G0/G1期。人参皂苷CK降低了He La内线粒体膜电位水平,使细胞内活性氧水平升高,使细胞发生凋亡性死亡。人参皂苷CK通过调控内质网和线粒体途径中的相关基因和蛋白水平如PERK、ATF-4、IRE1α、Chop、Bcl-2和Caspase家族来促进细胞的凋亡。LC3B免疫荧光试验表明人参皂苷CK诱导细胞发生了自噬,通过检测Beclin1、Atg5、LC3B和P62的表达水平,验证了这一结果。（2）人参皂苷CK抑制He La细胞迁袭及相关机制研究。通过细胞划痕愈合实验和Transwell实验,观察到人参皂苷CK能够在一定程度上抑制细胞迁袭的水平。人参皂苷CK通过调控MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin等与细胞迁袭相关的基因和蛋白的表达,进而抑制细胞迁袭。再通过研究RAS/MEK/ERK和PI3K/AKT/Gsk3β信号通路关键因子的表达,发现人参皂苷CK抑制细胞迁袭与RAS/MEK/ERK和PI3K/AKT/Gsk3β通路相关。通过Western blot实验探究了内质网与线粒体途径、自噬与凋亡途径、内质网应激与细胞迁袭途径之间相互作用的关系。加入内质网应激抑制剂4-PBA、自噬抑制剂3-MA、凋亡抑制剂Z-LEDH-FMK和PERK抑制剂Gsk2656157进行验证。（3）人参皂苷CK联合顺铂对Hela细胞的协同抑制效果及其机制。通过MTT实验分别确定了人参皂苷CK和顺铂的半抑制浓度为45.95μM和31.32μM。通过联合用药实验搭配CI值的计算,确定了两者联合之后抑制率最高、协同效应显著的浓度组合进行后续实验。人参皂苷CK（22.5μM）+顺铂（13.5μM）搭配下,可以抑制细胞的集落形成能力和EMT,其机制可能与RAS/MEK/ERK和PI3K/AKT通路有关。人参皂苷CK对DDP诱导的HEK293细胞氧化应激损伤具有显著的保护作用。其内部机制是通过上调抗氧化酶（SOD、CAT和GSH-Px）的活性和抑制ROS和MDA的水平。
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