论文部分内容阅读
研究目的1、明确细胞增殖抑制基因(hyerplasia suppressor gene,HSG)对慢性阻塞性肺病(Chronic Obstrutive Pulmonary Disease,COPD)气道重塑干预的机制。2、探索止咳化痰苗药(紫金牛、铁扫帚)抑制COPD气道重塑的作用机制,为临床研究打下实验理论基础。研究方法将健康雄性SD大鼠分为正常组、COPD大鼠空白组、止咳化痰苗药(紫金牛、铁扫帚等量)灌胃治疗组、地塞米松肌注治疗组。采用烟熏加气道内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,分别予苗药(紫金牛、铁扫帚)灌胃治疗组、地塞米松肌注治疗。并采用酶联免疫法(ELISA)吸附剂测定方法检测肺泡灌洗液(BALF)中血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)、转化生长因子(Platelet derived growth factor,TGF-β1)的浓度表达量。然后分别提取大鼠的小气道,进行小气道成纤维细胞原代培养,运用免疫印迹法(western bloting)检测的气道成纤维细胞中rHSG基因的蛋白表达,逆转录—聚合酶联反应法(RT-PCR)检测气道成纤维细胞中rHSG基因的mRNA的表达情况。研究rHSG、 PDGF、TGF-β1在COPD小气道成纤维细胞中及止咳化痰苗药治疗后的表达情况,及该基因与细胞因子PDGF、TGF-β1之间的相关性。结果1、正常大鼠组rHSG基因的蛋白、mRNA呈过表达,而COPD模型大鼠组呈低表达,具有显著统计学意义(P<0.01)；细胞因子PDGF、TGF-β1在正常组低表达,COPD模型大鼠组过表达,具有显著统计学意义(P<0.01)。2、COPD模型治疗组(苗药治疗组、地塞米松治疗组)rHSG基因的蛋白、mRNA的表达量均高于COPD模型对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)；而COPD模型治疗组(苗药治疗组、地塞米松治疗组)细胞因子PDGF、TGF-β1的表达量均低于COPD模型对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。3、rHSG基因表达与细胞因子PDGF、TGF-β1表达呈负相关,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论1、细胞增殖抑制基因(hyerplasia suppressor gene,HSG)通过下调血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)、转化生长因子(Platelet derived growth factor,TGF-β1)抑制COPD气道重建。2、上调HSG基因,抑制PDGF、TGF-β1的表达是止咳化痰苗药(紫金牛、铁扫帚)干预COPD气道重建的机理之一。