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目的:p130Cas是Cas家族成员与多种人类癌症的发生和发展有关,在非小细胞肺癌中可以促进肺癌的增殖、侵袭和转移。放射性治疗是治疗非小细胞肺癌的重要手段是和手术联合治疗的重要方法,但大多数患者会出现放疗抵抗的作用,p130cas在肺癌放射性治疗中是否发挥作用以及作用机制尚不清楚。研究方法:首先我们构建了p130cas稳定过表达的H460和A549稳转肺癌细胞系,用western blot检测了p130cas相关FAK-SRC通路的磷酸化水平以及pull-down技术检测Rac1-GTPrS的活性,根据FAK-SRC的磷酸化水平增高以及RAC1-GTPrS活性升高我们进一步用western blot检测了YAP的核蛋白表达量以及用qPCR检测了YAP下游靶mRNA水平,同时用荧光素酶报告基因检测了转录增强因子TEAD4的水平同时我们用免疫共沉淀技术检测p130cas与YAP可以发生相互作用。我们分别抑制FAK的磷酸化水平以及抑制RAC1的活性以后再进行同样的检测。同时通过western blot和MTS实验以及集落形成实验来研究p130cas在非小细胞肺癌细胞对放疗敏感性发挥生物学作用,我们用免疫荧光分析和western blot来检测细胞受到放疗照射后p130cas过表达细胞系γH2AX变化。接下来我们为了探索p130cas发挥放疗抵抗作用的具体机制,在稳定转染的细胞系中分别加入FAK抑制剂pf562271、瞬时干扰FAK以后检测放疗敏感性的变化,加入YAP抑制剂verteporfin以及转染shyap质粒以后检测放疗敏感性的变化来探究p130cas发挥放疗抵抗作用的具体机制。结果:我们用western blot检测发现p130cas过表达的细胞FAK和SRC磷酸化水平增加;用pull-down实验检测发现P130cas过表达以后Rac1小GTP酶活性增加;YAP核蛋白表达量增加,同时YAP下游靶mRNA CTGF、CYR61的mRNA水平升高,荧光素酶报告基因检测转录增强因子TEAD4的水平增加;免疫共沉淀结果显示p130cas可以和YAP、FAK结合。分别对转染和未转染p130cas的细胞系进行照射,检测p-ATM和p-CHK2蛋白水平,发现p130cas过表达以后p-CHK2和p-ATM表达下调,说明p130cas可以抑制非小细胞肺癌放疗以后DNA损伤修复通路的激活;同时分别用western blot和免疫荧光检测p130cas的过表达以后r-H2AX水平发现p130cas过表达的细胞照射后r-H2AX的蛋白表达增高免疫荧光显示更少的损伤焦点,以上我们得出结论p130cas可以增强非小细胞肺癌的放疗抵抗作用。我们加入FAK的特异性磷酸化抑制剂pf562271以及干扰掉FAK蛋白以后,用western blot和免疫荧光分别检测r-H2AX的水平发现FAK抑制掉以后发现p130cas的放疗抵抗作用被逆转,同时加入YAP的抑制剂verteporfin以及转染shyap质粒以后发现p130cas的放疗抵抗作用也被逆转了。结论:p130cas可以通过FAK的激活使YAP蛋白核表达量增加同时下游靶mRNA CTGF、CYR61的mRNA水平增加,荧光素酶报告基因显示p130cas过表达以后TEAD4的荧光强度增加。加入FAK特异性磷酸化抑制剂pf562271后YAP核蛋白变化、mRNA水平CTGF和CYR61的mRNA水平变化以及荧光素酶报告基因TEAD4的变化均被逆转。p130cas通过抑制损伤修复通路的激活发挥放疗抵抗作用,当FAK的磷酸化被抑制、FAK蛋白水平减少、抑制YAP与TEAD4的结合以及抑制掉YAP蛋白水平以后放疗抵抗用均被逆转,因此p130cas可以通过FAK和YAP的表达和活化发挥放疗抵抗作用,p130cas可以成为针对放疗敏感性的关键治疗靶点。