新疆阿魏化学成分的研究

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目的:新疆阿魏Ferula sinkiangensis K. M. Shen是新疆维吾尔族常用药,《中华人民共和国药典》2010版有收载。本研究按照薄层色谱法(中国药典2010年版附录VIB),采用不同提取方法,筛选合适的展开系统和显色方式,采用不同检视方法,研究新疆阿魏化学成分的薄层特征,建立鉴别新疆阿魏苯丙素类及含硫化合物类化学成分的薄层色谱方法。建立阿魏中阿魏酸HPLC含量测定方法,并检测十个批次新疆阿魏中阿魏酸的含量。建立新疆阿魏高效液相色谱的指纹图谱。测定新疆阿魏的总抗氧化活性;并结合DPPH-薄层生物自显影法鉴别新疆阿魏抗氧化活性成分。初步研究新疆阿魏的吸收情况。方法:1.分别以稀盐酸、甲醇提取新疆阿魏;以环己烷-二氯甲烷-冰乙酸(8:8:1)、甲苯-乙酸乙酯(10:3)、正己烷-石油醚(19:1)为展开系统;以1%三氯化铁乙醇溶液-1%铁氰化钾及碘蒸气显色;分别于366nm和可见光下检视。2.选择Agilent Prep-C18Scalar色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液(14:86)为流动相,选择流速1.0mL·min-1,以323nm为检测波长,测定阿魏酸含量。3.设计梯度洗脱程序,建立新疆阿魏的HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版及ChemPattern1.51对新疆阿魏的高效液相色谱结果进行分析。4.采用UV法测定新疆阿魏供试品溶液清除DPPH自由基的能力,计算清除率EC50;按照已建立的薄层色谱条件,喷以DPPH溶液,检测新疆阿魏供试品中的抗氧化活性成分。5.大鼠灌胃新疆阿魏供试品冻干粉溶液后,肝门静脉采血,离心,除蛋白后以HPLC测定,考察入血成分。结果:1.按照药典的薄层色谱条件,供试品溶液在366nm下检视到9个斑点,显色后可见光下检视到4个斑点。甲醇提取物以甲苯-乙酸乙酯展开,在366nm下有13个斑点,显色后有10个斑点;以正己烷-石油醚展开,显色后可见光下检视到两个斑点。2.薄层色谱及HPLC结果均显示新疆阿魏各号间阿魏酸含量及成分之间有差异。3.新疆阿魏高效液相色谱指纹图谱结果分析表明采集到的新疆阿魏样品分为2类。4.新疆阿魏甲醇提取液对DPPH自由基的EC50为1.67mg·mL-1。5.初步得到新疆阿魏化学成分的吸收特征。结论:建立了新疆阿魏化学成分物质群的薄层鉴别条件,为全面进行质量控制提供了手段和方法。新疆阿魏指纹图谱可以为新疆阿魏的真伪或优劣提供鉴别方法,为进一步进行制剂研究奠定基础。采用TLC-DPPH法可对新疆阿魏抗氧化活性物质进行测定。
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