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研究背景：脑胶质瘤是一种最常见的颅内肿瘤，具有易恶变、易复发等特点，WHO将其分为4个等级，Ⅰ、Ⅱ级恶性度偏低，而Ⅲ、Ⅳ级恶性度偏高。最新研究显示，低度恶性胶质瘤具有向高恶性度胶质瘤转变的趋势。CD44是一种未分类的粘附分子，广泛参与到了肿瘤的复发、转移过程中。最新研究表明，CD44在脑胶质瘤恶性进展中发挥了重要作用，但其具体作用机制仍不清楚。microRNA是一类非编码单链小分子RNA，可以通过非完全互补配对与其目标mRNA分子的3’端非编码区域(3’UTR)结合，并进而抑制mRNA的翻译或降解mRNA，抑制靶基因的表达，在基因的转录后层次发挥表达调控作用。研究表明，microRNA对正常细胞从增殖到凋亡的各种基本功能都具有调控作用[6]，同时也广泛地参与到了肿瘤的发生、发展过程中。miR34a是一种常见的microRNA分子，在多种肿瘤中呈现低表达，被视为一种抑癌分子。最新研究表明[8]，在前列腺癌中miR34a直接靶向调控CD44基因抑制了前列腺癌干细胞的侵袭转移能力。因此，我们推测在胶质瘤中miR34a也参与了直接靶向调控CD44基因而影响胶质瘤的恶性演进过程。目的：验证CD44与脑胶质瘤恶性相关性，通过体外细胞学功能实验阐明CD44在脑胶质瘤恶性演进中的作用机制，同时寻找CD44上游的调控microRNA，进一步阐明其调控机制。方法和结果：在临床胶质瘤标本中，通过qRT-PCR、免疫组织化学染色法和WesternBlot方法分别在mRNA水平和蛋白水平发现CD44的表达与胶质瘤的恶性程度呈正相关。利用间接免疫荧光实验和Western Blot实验分别定位与定量研究发现胶质瘤细胞U251、A172、U87等均有CD44的表达，而SHG44则不表达。设计合成有效地干涉CD44的双链siRNA序列，通过qRT-PCR和Western Blot方法分别在mRNA水平与蛋白水平发现随着转染时间的延长，CD44的表达量出现明显的下调。通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、Transwell小室侵袭实验和流式细胞术发现转染CD44的干涉siRNA序列后，胶质瘤细胞的增殖、迁移侵袭能力明显降低，细胞凋亡数目明显增多。在胶质瘤细胞中，通过Western Blot方法发现随着CD44的下调，Erk1/2、p-p38、p-53、p-21被逐渐上调，而p-Erk1/2却被逐渐下调。通过双荧光素酶报告系统实验证明了CD44是miR34a的靶基因。在临床胶质瘤标本中通过qRT-PCR发现miR34a与胶质瘤恶性程度呈负相关。在胶质瘤细胞中，通过qRT-PCR和Western Blot方法分别在mRNA水平与蛋白水平发现上调miR34a后CD44的表达受到了抑制。结论：CD44可以被miR-34a负向调控，进而影响其下游的多个分子而参与到脑胶质瘤的恶性进展过程中。这为明确胶质瘤恶性进展的发生机制提供了重要的理论依据。