论文部分内容阅读
【目的】卵巢癌(ovarian cancer,OA)是死亡率最高的妇科恶性肿瘤之一。通过MTT、迁移侵袭实验,研究不同浓度的孟鲁司特钠(montelukast,MON)及不同作用时间对卵巢癌ID8细胞的抑制作用,在C57BL/6小鼠皮下构建卵巢癌ID8细胞移植瘤,观察不同浓度的MON对OA抑制作用,初步探讨MON抑制卵巢癌的机制。【方法】1、利用MTT法监测25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L浓度MON作用24h,48h,72h后,三个时间点ID8细胞增殖抑制效应。2、采用迁移侵袭实验观察MON对ID8细胞生物行为学的影响。3、建立卵巢癌ID8细胞C57BL/6右侧腹股沟皮下瘤,取40只荷瘤成功的C57BL/6小鼠随机分成5组,孟鲁司特钠组:分别用孟鲁司特钠2.5mg/kg、5 mg/kg、10mg/kg灌胃,洛铂组:洛铂5mg/kg腹腔注射,生理盐水组(对照组):0.9%氯化钠注射液5 ml/kg灌胃。不同浓度孟鲁司特钠组和生理盐水组每天灌胃1次,连续8天,洛铂组腹腔注射治疗1次,自由进食、饮水,标准SPF饲养。每天观察C57BL/6小鼠的一般情况,测量其移植瘤的体积和小鼠体重1次,并做好详细记录。4、摘眼球收集血,利用ELISA法测血清中IL-6和TNF-α的含量。5、计算肿瘤的相对增殖率,通过免疫组化法检测孟鲁司特钠5mg/kg和生理盐水组肿瘤组织中Ki-67、CD34的表达。【结果】1、MTT实验结果显示:同对照组相比,不浓度MON对ID8细胞的增殖的抑制作用程度有差异,抑制率随孟鲁司特钠浓度增大而增强,呈浓度依赖性,其中孟鲁司特钠浓度100μmol/L对卵巢癌ID8细胞的增殖抑制作用最强;在同一浓度中,除了浓度为MON 25μmol/L作用24h后(P>0.05)差异无统计学意义,MON 25μmol/L作用48h和72h后(P<0.05)差异有统计学意义;MON 50μmol/L和MON 100μmol/L 3个时间点OD值变化(P<0.05)都有统计学意义;根据公式计算细胞生长抑制率,同OD值统计学结果一致。2、迁移实验结果显示:同对照组相比,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的孟鲁司特钠迁移的细胞数减少,有统计学差异(P<0.05),MON 100μmol/L时迁移的细胞数最少,不同浓度孟鲁司特钠组之间,有统计学差异(P<0.05)。3、侵袭实验结果显示:同对照组相比,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的孟鲁司特钠迁移的细胞数减少,有统计学差异(P<0.05),MON 100μmol/L时迁移的细胞数最少,不同浓度孟鲁司特钠组之间,有统计学差异(P<0.05)。4、同对照组相比,不同浓度孟鲁司特钠组及洛铂组肿瘤体积的生长速度均明显减缓,孟鲁司特钠2.5mg/kg/d无统计学差别(P>0.05),孟鲁司特钠5mg/kg/d、孟鲁司特钠10mg/kg/d和洛铂组均有统计学差别(P<0.05),孟鲁司特钠2.5 mg/kg、5 mg/kg、10mg/kg组及洛铂组的相对肿瘤抑制率分别为9.92%、29.01%、30.53%和59.54%。与洛铂组相比,孟鲁司特钠2.5 mg/kg有统计学差别(P<0.05),孟鲁司特钠5mg/kg/d和孟鲁司特钠10mg/kg/d均无统计学差别(P>0.05)。5、与对照组比,孟鲁司特钠各组及洛铂组IL-6和TNF-α的水平均下降,且洛铂组IL-6最低,孟鲁司特钠10mg/kg组TNF-α的最低。6、与生理盐水组相比,孟鲁司特钠5 mg/kg组肿瘤组织CD34、ki67的表达下调。【结论】1、孟鲁司特钠能抑制ID8细胞增殖、迁移、侵袭;2、孟鲁司特钠对卵巢癌有抑制作用,其作用机制可能与降低血清中IL-6和TNF-a含量水平,降低组织中CD34和Ki67的表达有关。