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背景与目的:心肌缺氧是冠心病的关键病理过程,常常导致心肌细胞的损伤和调亡,进而使心肌细胞失去生理功能。近年来研究发现,mi RNA在心肌细胞凋亡中的作用及其表达异常引起了广泛关注,mi R-206便是其中之一,它在心肌低氧应激下的表达会发生明显变化。我们实验室的前期研究发现,mi R-206在冠心病人循环血中的水平高于非冠心病人。然而,mi R-206在低氧诱导心肌细胞中的作用及其机制仍不清楚。因此,深入研究mi R-206在低氧诱导心肌细胞凋亡过程中的作用及其机制,将为临床靶向延缓心肌损害提供新的视角。方法:将心肌细胞H9c2置于1%O2、94%N2、5%CO2的三气培养箱内,模拟心肌缺氧;在缺氧环境下分别转染mi R-206模拟物agomir及其阴性对照agomirNC,mi R-206抑制剂antagomir及其阴性对照antagomir-NC;MTT法检测干扰后低氧环境下各组心肌细胞活力;Annexin V/PI双标法流式细胞术检测干扰后低氧环境下各组心肌细胞凋亡率;q RT-PCR法检测干扰后低氧环境下各组mi R-206的靶基因EGFR、HIF-1α和IGF-1的m RNA水平变化;Western Blot检测干扰后低氧环境下各组EGFR、HIF-1α和IGF-1蛋白表达水平变化。双荧光素酶报告基因法验证mi R-206与其靶基因EGFR和HIF-1α的m RNA 3’UTR的结合。结果:MTT法检测显示agomir组较agomir-NC组细胞活力增高,而antagomir组较antagomir-NC组细胞活力下降;流式细胞术检测显示agomir组较agomirNC组细胞凋亡率降低,而antagomir组较antagomir-NC组细胞凋亡率升高;q RT-PCR法检测发现干扰后各组EGFR、HIF-1α和IGF-1的m RNA水平无变化,但Western Blot结果显示agomir组较agomir-NC组EGFR和HIF-1α蛋白表达水平降低,而antagomir组较antagomir-NC组EGFR和HIF-1α蛋白表达水平升高。双荧光素酶报告基因检测显示mi R-206可以直接与EGFR和HIF-1α的m RNA 3’UTR结合。结论:Micro RNA-206在低氧诱导的心肌细胞损伤和凋亡过程中,发挥了保护心肌细胞的作用。这种抗损伤和凋亡的作用正是通过转录后水平负性调控EGFR和HIF-1α的表达发挥作用,这为延缓心肌损害提供了一个新的潜在的药物作用靶点。