某些贵金属纳米结构的表面等离子体共振效应可以显著增强荧光,并已用于生物分析。但目前稳定可控的贵金属纳米结构如核-卫星纳米结构的组装方法仍然较少,同时作为探针很少直接用于细胞膜表面受体分析。本文基于1,2,4,5-四氮杂苯(Tz)和反式-环辛烯(TCO)的高效点击化学反应,提出了一种构建稳定、可控的核-卫星纳米结构的新方法,研究了其对细胞膜上荧光分子的增强荧光效果和机理,并将该荧光增强效应应用于细胞膜HER2受体二聚化抑制分析,建立了二聚化抑制剂的分析方法。具体内容如下:(1)基于点击化学法,组装了稳定可控的核-卫星型和哑铃型纳米结构,并建立了单颗粒分析的表征方法。将Tz和TCO与带巯基和琥珀酰亚胺酯的聚乙二醇反应,然后分别修饰在70 nm金纳米颗粒(GNPs)和30 nm GNPs表面,制备得到两种可单独稳定保存的Au-Tz和Au-TCO探针溶液。组装时,按照70 nm GNPs表面需要结合的30 nm GNPs的数目,调节两者的反应浓度比例进行组装;利用Tz和TCO之间发生的Diels-Alder反应,制备出不同的核-卫星纳米结构。通过反应条件、表面修饰条件优化和简单的离心分离纯化后可得到结构均一的核-卫星纳米结构;制备的纳米结构可以在较高的盐浓度(0.5 M NaCl)中稳定保存。采用该方法,以TCO修饰的银纳米颗粒(Ag-TCO)为介导,构建了哑铃型纳米结构。并建立了共振光散射相关光谱研究哑铃型纳米结构组装过程的方法,研究发现,随着小尺寸Ag-TCO的加入,检测到的粒子数逐渐减少,而特征扩散时间和单颗粒亮度都逐渐增大,表明Au-Tz在Ag-TCO介导下发生了二聚化组装。该表征结果与TEM获得的结果相一致,可用于组装过程的快速表征。(2)研究了核-卫星纳米结构对细胞表面荧光分子的增强荧光效应,揭示了增强荧光的机理,并且将该增强效应应用到细胞表面HER2受体二聚化抑制分析,建立了二聚化抑制剂的分析方法。在561 nm汞灯激发下,研究了核-卫星纳米结构对细胞表面HER2受体上结合的Aptamer-Cy3的荧光增强作用。发现不同的卫星结构具有不同的增强效果,当大尺寸的金纳米颗粒(核)表面结合小尺寸金纳米颗粒(卫星)的数目超过6后,荧光可以增强近200%。瞬态荧光寿命分析实验和细胞MTT分析实验揭示了增强荧光的机理,发现核-卫星纳米结构对HER2受体的二聚化具有抑制作用,并且使Cy3分子的荧光寿命降低,导致了细胞膜表面的荧光增强。并基于核-卫星纳米结构在细胞膜上对荧光的增强效应,以拉帕替尼药物对HER2受体的二聚化抑制作用为模型,建立了一种HER2受体二聚化抑制剂分析方法。