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目的：通过对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离、培养、传代、纯化，掌握细胞培养的基本技术。观察大鼠左归丸含药血清对第二代(P2)BMSCs进行成软骨条件干预过程；诱导产物进行软骨相关检测，利用基因芯片技术对BMSCs成软骨分化过程中的可能相关lncRNA进行预测、筛选；并进一步验证lncRNA对BMSCs成软骨分化的影响，为探讨左归丸对BMSCs成软骨分化影响的表观遗传学机制,进一步阐明“肾主骨”理论机制，提供新思路。 方法：用左归丸汤剂给成年SD大鼠灌胃，腹主动脉采血，制备血清；以4周龄大鼠作为对象，用含有10％胎牛血清的低糖养基，改良全骨髓贴壁法提取原代BMSCs，在细胞培养箱(饱和湿度、37℃、5%CO2环境)中培养，根据生长状况进行换液，细胞铺满瓶底70%-90%时进行传代。通过不断的传代和换液，进行纯化。培养至P2代时，进行细胞形态和流式细胞技术(FCM)鉴定；并用左归丸含药血清对P2代干细胞进行细胞毒性试验，通过MTT法筛选出大鼠BMSCs生长和增殖的最适应含药血清浓度；取P2代干细胞分为三组：空白组(含10%FBS的H-DMEM完全培养基)、对照组(无血清的成软骨诱导条件的H-DMEM)、试验组(含10%左归丸含药血清的成软骨诱导条件H-DMEM完全培养基)，同一环境不同诱导条干预21天；观察诱导过程中的细胞形态变化，利用实时荧光定量PCR(Real time RT-PCR)检测Ⅱ型胶原的mRNA含量，以检验成软骨诱导的结果。通过空白组与对照组比较，利用基因芯片技术筛选差异的相关lncRNA，并与实验组组的lncRNA谱进行比较，验证左归丸对成软骨及相关lncRNA的作用。 结果： ①采用改良的全骨髓贴壁法提取细胞，通过细胞形态学及细胞表面抗原鉴定（流式细胞技术)证实：提取和培养的细胞是骨髓间充质干细胞； ②左归丸含药血清MTT结果：5%和10%左归丸含药血清均能促进BMSCs增殖，与10%的FBS组比较，10%左归丸含药血清组促进增殖作用更为显著； ③三组细胞通过不同诱导条件诱导分化21天后，通过PCR技术检测发现：空白组Ⅱ型胶原mRNA表达低于对照组和试验组，对照组表达高于试验组(P﹤0.05)； ④三种不同条件下干预21天后，通过基因芯片技术筛选出差异lncRNA表达谱：共发现5个lncRNA显著上调，4个lncRNA显著下调。 结论：全骨髓贴壁法体外提取和培养骨髓间充质干细胞，是一种切实可行的提取方法，操作简单，易于掌握；10%中药复方左归丸含药血清促进骨髓间充质干细胞生长和增殖最明显；与骨髓间充质干细胞成软骨分化的相关lncRNA可能后有XR_007242、MRuc008sbh、U50044、XR_008107、uc.161+、MRAK166199、BC098827、BC085903和S74338；左归丸可能通过调控XR_007242、MRuc008sbh、U50044、XR_008107、uc.161+的上调和MRAK166199、BC098827、BC085903、S74338下调表达，来影响BMSCs向软骨细胞分化。