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目的桥本甲状腺炎(HT)是一种自身免疫性甲状腺疾病(AITD),其特征是血清中存在高滴度的自身甲状腺抗体(TPOAb、Tg Ab)。HT常见情绪异常表现,焦虑和抑郁多见。妊娠期女性血清TPOAb抗体水平与情绪障碍有明显关系。额叶是影响情绪行为的关键大脑区域。谷氨酸(glutamic acid,Glu)是中枢神经系统要的神经递质,对焦虑与抑郁发病机制起重要作用。Glu主要依赖Glu转运体来调节维持神经细胞外的低浓度。因此,本研究拟通过建立妊娠HT动物模型,观察额叶Glu及其转运体的变化,试图探讨小鼠在妊娠状态下,HT对额叶Glu及其转运体水平的影响。方法适应性饲养50只清洁级健康NOD雌性小鼠(6周龄)1周后,随机分为两组,即正常对照组(CON组)20只、桥本甲状腺炎组(HT组)30只。将猪甲状腺球蛋白(p Tg)于HT组小鼠尾根部皮下注射制备HT小鼠模型。具体操作步骤如以下所述:在生理盐水中溶入p Tg试剂(100μl生理盐水溶解25μg p Tg粉末),分别在一次性注射器中吸入等量弗氏完全佐剂(CFA)与p Tg溶液,接通三通管,冰浴条件下研磨至完全乳化,即将白色乳液滴于冷水中,能浮于液体表面长时间不散开。固定HT组小鼠,在小鼠尾根部1 cm处用一次性注射器皮下注射乳状剂0.1 ml。同样于CON组小鼠尾根部1 cm处注射等量不含p Tg的CFA乳化剂。14 d后将CFA替换成弗氏不完全佐剂(IFA),与p Tg制备成乳化剂,同样操作方法在每只HT组小鼠尾根部1 cm处皮下注射0.1 ml乳化剂,在CON组注射等量不含p Tg的IFA乳化剂。造模周期49 d。造模成功后,将各组雌鼠与健康NOD雄鼠按2:1比例合笼,采取观察阴栓的方式确定妊娠模型。采用酶联免疫吸附法检测孕鼠血清促甲状腺激素(TSH)水平;电化学发光免疫分析法测定血清甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)水平和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)水平;制备甲状腺大体标本、HE染色法镜下观察小鼠甲状腺组织形态;通过酶联免疫吸附法检测妊娠小鼠额叶Glu浓度;Western blot法检测孕鼠额叶中囊泡谷氨酸转运体VGLUT 1和兴奋性谷氨酸转运体EAAT 2的蛋白表达水平;RT-q PCR观察孕鼠额叶VGLUT 1,EAAT 2m RNA水平的表达。结果1.两组孕鼠甲状腺抗体与激素水平:HT组血清甲状腺抗体水平(Tg Ab、TPOAb)较CON组升高(P<0.05),两组血清甲状腺激素(T3、T4、TSH)水平差异无统计学意义;2.两组孕鼠额叶谷氨酸水平:相较于CON组,HT组孕鼠额叶谷氨酸浓度水平升高(P<0.05);3.两组孕鼠甲状腺标本叙述及HE染色结果:较CON组而言,HT组孕鼠甲状腺标本肉眼可见其颜色加深,体积增大,质地触之较韧;甲状腺HE染色结果:HT组孕鼠甲状腺内可见部分甲状腺滤泡破坏及大量淋巴细胞浸润,CON组孕鼠甲状腺内滤泡相对完整。4.两组孕鼠额叶内谷氨酸转运体蛋白表达情况:HT组孕鼠额叶VGLUT1蛋白表达水平较CON组降低(P<0.05),两组孕鼠额叶EAAT2的蛋白表达水平差异无统计学意义。5.两组孕鼠额叶谷氨酸转运体m RNA表达情况:与CON组相比,HT组孕鼠额叶VGLUT 1的m RNA表达降低(P<0.05),两组孕鼠额叶内EAAT 2 m RNA表达水平差异无统计学意义。结论HT可导致孕鼠额叶Glu浓度升高,谷氨酸转运体VGLUT 1蛋白表达下降,提示了HT可导致额叶Glu代谢紊乱。