雌激素对于女性生殖器官的发育及第二性征的维持具有不可替代的地位，对骨质代谢和脂类代谢有着重要的调节作用。女性进入绝经期后，随着卵巢功能的衰退和体内雌激素水平的下降，女性将出现更年期综合症，骨质疏松、心血管疾病、老年痴呆等疾病的发病率也随之上升。 雌激素替代疗法(Estrogen replacement therapy,ERT)应运而生，它是给予具有雌激素活性的药物，以纠正机体由于雌激素分泌不足所造成疾病的一种医疗措施。ERT可缓解由于雌激素降低引起的各种更年期症状，可降低骨质疏松性骨折和冠心病的发生率。但长期应用雌激素有诱发子宫内膜癌、乳腺癌等的危险。 植物雌激素作为雌激素的替代品，以其安全性及显著的效果，受到越来越多的关注。本课题在前期研究卷柏具有类雌激素样活性的基础上，以我国不同产地、种属的十种卷柏为研究对象，利用整体动物实验、体外细胞培养实验并结合报告基因检测技术探讨了各自植物雌激素样作用及其可能的作用机制和影响因素；并利大鼠成骨肉瘤细胞模型，对卷柏抗绝经后骨质疏松活性成分进行了筛选。 本论文分两部分第一部分：卷柏雌激素活性筛选的实验研究目的：评价十种卷柏的雌激素活性，并探讨卷柏具有植物雌激素作用的活性部位。 方法：首先，采用小鼠子宫增重法，观察用药前后小鼠子宫系数和体重变化情况；采用MTT法检测受试物含药血清及受试物直接对MCF-7细胞增殖作用的影响；并结合报告基因技术，比较了醇提和水提两种不同提取方法以及十种卷柏的雌激素活性，综合评价筛选出雌激素活性最强的卷柏。然后，采用MTT法观察卷柏总提物及卷柏上D101所得不同部位流份对乳腺癌细胞MCF-7增殖活性的影响，并结合报告基因技术对活性部位的雌激素活性进行比较。 结果：分为三部分(1)不同提取方法对卷柏雌激素活性影响的实验研究。子宫增重实验显示：醇提部位组比水提部位组小鼠体重增长快，水提部位组小鼠子宫平均湿重及子宫系数比醇提部位组高；MCF-7细胞增殖实验显示：卷柏醇提物和水提物在一定的浓度范围内均能显著促进MCF-7细胞的增殖，但水提物比醇提物对MCF-7细胞增殖能力强；血清药理显示：卷柏醇提物和水提物含药血清在血清含量为5％时，醇提比水提促细胞增殖作用强，而在血清含量为2.5％时，水提比醇提对MCF-7促增殖能力强。(2)十种卷柏雌激素活性筛选的实验研究。 子宫增重实验显示：灌胃JB6和JB7可使小鼠的子宫系数明显升高，与正常组相比差异显著(P<0.01)；灌胃JB5可促进小鼠体重增长加速，与正常对照组比较P<0.05；血清药理显示：JB6、JB7、JB10、JB1和JB9五组中药含药血清可显著促进MCF-7细胞增殖；MCF-7细胞增殖实验结果显示：JB3，JB5具有较强的促进MCF-7细胞增殖的活性，在0.2 mg/ml，0.3 mg/ml时，与正常组比较差异极显著(P<0.01)，与E2无统计学意义；JB10在0.3 mg/ml，JB9在0.4 mg/ml，0.5 mg/ml时对MCF-7细胞也具有较强的促增殖活性，另外JB6和JB7在适当的剂量时，对MCF-7细胞也具有较强的增殖活性；JB8和JB1在适当的剂量对MCF-7细胞有一定的促进作用；报告基因结果显示：由ERα介导时，JB3、JB6、JB8、JB4及JB7均能诱导报告基因Luc的表达(P<0.01，P<0.05)；由ERβ介导时，除JB3外均能诱导报告基因Luc的表达(P<0.01)；(3)卷柏(Selaginella tarmariscina(Beauv.)Spring)活性部位的筛选。MCF-7细胞增殖实验结果显示：卷柏总提物及卷柏水部位、10％EtOH、50％EtOH部位能够显著促进MCF-7细胞增殖，与正常组比较差异极显著(P<0.01)；报告基因结果显示：不论是由ERα或ERβ介导，卷柏活性部位给药孔，荧光素酶活性都显著高于正常孔(P<0.01，P<0.05)，但仍低于E2孔(P<0.01)。并且卷柏与ERα的亲和力较由ERβ介导时的亲和力大。 结论：卷柏具有弱雌激素作用(1)卷柏水提物比醇提物具有更高的雌激素活性。(2)除JB2无明显的雌激素样活性外，其余9种卷柏都有一定的雌激素样活性，JB6是十种卷柏中雌激素活性较强较稳定的一种。(3)卷柏属植物卷柏水提物上大孔吸附树脂所得水部位、10％EtOH部位及50％EtOH部位具有较强的雌激素活性，且50％EtOH部位雌激素活性远高于水部位和10％EtOH部位。第二部分：卷柏(Selaginella tamariscina(Beauv.)Spring)对成骨样细胞UMR106增殖作用的实验研究目的：考察了卷柏属植物卷柏总提物及其上大孔吸附树脂所得不同部位对成骨样细胞UMR106的增殖作用。 方法：通过卷柏不同部位和UMR106成骨样细胞共同体外培养，用MTT方法检测了各部位对UMR106细胞增殖的作用。 结果：卷柏总提物及30％EtOH、40％EtOH部位对细胞具有较强的促增殖作用，水部位也有一定的促增殖作用。而卷柏10％EtOH、20％EtOH、50％EtOH部位对细胞增殖无明显影响。 结论：卷柏水部位、30％EtOH、40％EtOH可能含有直接作用于成骨细胞的活性成分。卷柏可能通过促进成骨细胞的增殖来发挥健骨及抗骨质疏松的作用。