单链抗体(Single chain variable fragment)具有分子量小,容易穿透组织等优点。但是,单链抗体亲和力较低,在血清中容易被清除,这些不足限制了单链抗体在临床上的应用。本研究利用人软骨多聚基质蛋白的超卷曲螺旋结构域(coiled coil domain, COMP48)可以形成五聚体的特点,将TRAIL死亡受体4(death receptor4, DR4)和死亡受体5(death receptor5, DR5)的单链抗体进行五聚化,以期延长单链抗体在体内的半衰期,提高单链抗体的亲合力和生物学效应,诱导肿瘤细胞发生凋亡,达到治疗肿瘤的目的。单链抗体可以利用COMP48结构域进行多聚化。单链抗体转化成五聚体后,亲和力得到加大增强。通过BIAcore仪器测量,单链抗体五聚体的亲合力常数KD值可达10-10M,而对应单链抗体的约为10-7M,亲和力提高近一千倍。ELISA分析结果表明,五聚体抗体分别特异识别其对应的受体,未见交叉反应。体外诱导凋亡和细胞抑制实验结果均表明,五聚体抗体与单链抗体相比具有更明显的肿瘤细胞(A54、colo205、HCT-116)杀伤效果,但是对正常细胞如PBMC及人慢性白血病细胞系K562没有杀伤作用,表明正常细胞及部分肿瘤细胞对抗体具有不敏感性。裸鼠荷瘤模型(人结肠癌colo205)结果显示,单链抗体和五聚体抗体均有不同程度的抑瘤效果。针对DR5的五聚体抗体8fcomp治疗效果最好,与其单链抗体形式相比具有显著性差异,但针对DR4的单链抗体4cmono的抑瘤效果好于其五聚体4ccomp,其原因还有待于进一步探讨。