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食管癌是世界常见肿瘤之一,其早期症状不明显,诊断时多为中晚期,易发生淋巴结转移。越来越多的研究表明,stathmin在多种肿瘤中高表达,并与肿瘤淋巴结转移、病理分期、不良预后、肿瘤耐药等多种临床参数相关。然而,stathmin在促进食管癌进程的相关机理尚不清楚,有待深入研究。本论文由两部分组成,第一部分揭示了 stathmin促进食管癌细胞体内外侵袭转移和增殖。本研究基于前期实验室通过蛋白质组学技术发现stathmin在食管癌组织中的水平显著升高。检测食管癌患者血清stathmin水平,发现stathmin血清水平显著升高,并与患者淋巴结转移相关,提示stathmin与食管癌转移具有相关性。通过构建稳定过表达stathmin细胞系,采用划痕、Transwell和集落形成等实验证实stathmin促进食管癌细胞体外侵袭转移和增殖。为了进一步探索stathmin促进食管癌细胞转移的机制,采用转录组实验分析stathmin过表达细胞内的分子水平变化。采用实时定量PCR验证,结果显示stathmin过表达细胞内黏附相关分子NT5E、LYPD3、CLCA2、CEACAM5、FAK、RASSF5、FN 和中间纤维家族分子 KRT6C、KRT15、KRT17、KRT13的mRNA水平显著升高。黏附实验分析显示过表达stathmin食管癌细胞与细胞外基质的黏附能力增强。免疫印迹分析,发现stathmin过表达细胞内 integrinα5β1、FAK 及 P-ERK 蛋白水平升高,而 integrinβ3、β4、β5、vinculin及ERK的水平无显著;此外keratin17的蛋白水平亦显著升高。敲降stathmin表达,integrinα5β1、FAK及P-ERK蛋白水平降低,ERK无显著改变。然而,敲降FAK、或封闭integrinα5活性,可抑制细胞与外基质的黏附;敲降FAK或抑制ERK磷酸化,可抑制细胞的移行。以上结果提示integrinα5β1/FAK/ERK通路在stathmin过表达细胞移行中发挥重要作用。论文第一部分揭示了 stathmin促进食管癌细胞侵袭转移的机理。论文第二部分揭示了过表达stathmin降低食管癌细胞对紫杉醇化疗敏感性。基于stathmin在细胞内具有调控微管稳定的活性,通过构建稳定过表达stathmin的食管癌细胞,发现stathmin过表达显著增强食管癌细胞对紫杉醇的耐受性,在相同处理条件下,紫杉醇对过表达stathmin细胞的抑制率显著下降。紫杉醇通过诱导caspase8、caspase9的活化,激发食管癌细胞凋亡,未见自噬相关分子LC3、BNIP3的活化。