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目的:研究洛伐他汀(Lovastatin,LV)对人三阴性乳腺癌干细胞样细胞(breast cancer stem-like cells,BCSLCs)的体外生物学特性以及对人三阴性乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:1、通过干细胞条件培养基悬浮培养法从人三阴性乳腺癌细胞和非三阴性乳腺癌细胞富集和扩增BCSLCs。用流式细胞技术检测其表面干细胞标志物CD44/CD24的表达。通过裸鼠皮下移植瘤实验证实乳腺癌干细胞的体内成瘤能力。2、用不同浓度LV在常氧或缺氧条件下对乳腺癌亲本细胞或干细胞样细胞进行处理,用MTT法测定细胞增殖活性,用划痕法测定细胞体外迁移能力,用流式细胞仪测定细胞凋亡。3、用不同浓度LV对人三阴性乳腺癌细MDA-MB-231进行处理,用蛋白质免疫印迹法分析乳腺癌干细胞标志蛋白CD44、EMT相关的核转录因子β-catenin和上皮标志物E-cadherin表达水平。4、小鼠皮下注射MDA-MB-231细胞1周后,给予不同浓度的LV(2mg/kg或10 mg/kg)或生理盐水,每周给药2次持续给药3周。每周测量瘤体体积;处死动物时取乳腺肿瘤组织测量瘤体重量;肿瘤组织经常规石蜡包埋,进行组织病理学和免疫组化分析。结果:1、经超低粘附悬浮培养法从三阴性及非三阴性乳腺癌细胞富集和扩增BCSLCs。用流式分析仪对MDA-MB-231来源的BCSLCs表面标志进行鉴定获得CD44+/CD24low的细胞纯度约80%;在裸鼠成瘤实验中,与MDA-MB-231亲本细胞相比,MDA-MB-231干细胞样细胞在裸鼠体内成瘤能力更强。表明我们分离富集的BCSLCs具有乳腺癌干细胞特征。2、与来源于非三阴性乳腺癌的亲本细胞和干细胞样细胞相比,LV能够优先抑制三阴性乳腺癌来源的亲本细胞和干细胞样细胞的增殖和迁移并优先促进其凋亡。另外,与亲本细胞相比,LV能够优先抑制乳腺癌干细胞样细胞的增殖。3、LV能够抑制三阴性乳腺癌细胞中与干细胞特征相关蛋白的水平,表明LV能够抑制乳腺癌细胞的干性特征。4、在裸鼠皮下移植瘤模型中,LV能够抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231移植瘤的瘤体重量和体积。瘤体组织标本免疫组化分析显示与对照组相比,LV处理组CD44、CD138蛋白水平显著降低,表明LV在体内能够抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231移植瘤的成瘤能力和干性特征。结论:1.通过悬浮培养法富集和扩增的BCSLCs具有乳腺癌干细胞特性。2.LV能优先抑制三阴性乳腺癌BCSLCs的增殖和迁移并且促进其凋亡。3.LV能够抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231移植瘤的成瘤能力和干性特征。