糖尿病大鼠认知功能损害和GFAP表达变化及胰岛素干预影响

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目的:通过研究糖尿病大鼠行为学变化及星形胶质活性标志物—胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的反应,探讨糖尿病认知功能损害时星形胶质细胞变化及其是否存在部位(海马、大脑皮层、基底节、脑室旁白质)选择性,以及胰岛素的干预效果。方法:选用健康成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠52只,体重180-250g,随机分为2组:1个月组(26只)及3个月组(26只)。每组再随机分为3组:糖尿病组(10只)、胰岛素治疗组(10只)及对照组(6只)。糖尿病组、胰岛素治疗组应用链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,胰岛素治疗组根据血糖情况皮下注射低精蛋白锌胰岛素注射液2-3U。所有大鼠每周固定时间测血糖2次,以保证实验过程中大鼠血糖保持在稳定水平。分别于1个月及3个月行Morris水迷宫测试,并取海马、基底节(即尾壳核)、脑室旁白质及额叶区行免疫组化检查,观察大鼠GFAP阳性细胞的表达情况。结果:1.空间学习记忆能力评价:与对照组比较,(1)糖尿病1个月组及3个月组大鼠游泳潜伏期均延长(P<0.05);(2)胰岛素治疗组:1个月组大鼠游泳潜伏期变化无统计学意义,3个月组大鼠游泳潜伏期延长(P<0.05)。2.GFAP阳性细胞表达情况:(1)对照组,3个月组较1个月组在海马区及侧脑室白质区GFAP阳性细胞数目增多(P<0.05)。(2)与对照组相应脑区比较,糖尿病1个月和3个月组形态学上表现为细胞密集、胞体肿大、突起增粗、增多;GFAP阳性细胞增多,1个月组无统计学意义,3个月组在侧脑室白质、尾壳核增多(P<0.05),在额叶及海马区改变无统计学意义;(3)与对照组相应脑区比较,胰岛素治疗1个月组和3个月组GFAP阳性细胞数目变化无统计学意义;与糖尿病组相应脑区比较,胰岛素治疗1个月组GFAP阳性细胞变化无统计学意义;3个月组GFAP阳性细胞数目在侧脑室白质、尾壳核减少(P<0.05),在额叶及海马区变化无统计学意义。结论:1.糖尿病大鼠在1个月即可出现学习、记忆障碍;2.糖尿病大鼠早期认知损害未发现星形胶质细胞变化,提示其认知损害并非星形胶质细胞所致,可能存在其他损伤机制;随糖尿病病程进展逐渐出现星形胶质细胞反应性增生,且此改变具有部位选择性;3.胰岛素可抑制星形胶质细胞反应,早期应用可延缓糖尿病认知功能损害的出现,但随着糖尿病病程的发展,胰岛素并不能阻止糖尿病认知功能损害的发生。
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