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目的：
本研究旨在探明外周血细胞miR-1275与缺血性脑卒中(Ischemic Stroke，IS)风险的关联，并揭示miR-1275参与IS发病的生物学机制。
方法：
(1)病例对照研究：外周血细胞miR-1275水平与IS风险关联研究：纳入了2016年11月至2017年08月就诊于深圳市人民医院的缺血性脑卒中患者(病例组)及同时期在中山大学附属第八医院做常规健康体检的人群(对照组)各279例，两组性别及年龄构成匹配。采集研究对象肘静脉血5ml作为外周血样本，用于提取RNA。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)获得miR-1275表达水平，并以U6为内参，通过计算-?Ct获得相对表达量。通过调查问卷收集所有研究对象的一般资料、临床检验指标。采用两样本t检验或Mann-WhitneyU检验比较各变量的组间差异；计数资料的比较采用卡方检验；采用非条件Logistic回归分析miR-1275表达水平与IS之间关联；通过ROC曲线和重分类分析模型检验miR-1275对IS的预测价值。利用SPSS22.0软件对数据进行统计学分析。
(2)生物学机制研究：首先使用生物信息学软件TargetScanHuman对miR-1275潜在的靶基因进行分析预测。其次，构建报告基因质粒后，分别通过双荧光素酶报告基因实验和定量RT-PCR实验，验证miR-1275对下游靶基因的调控。最后，使用miR-1275模拟物及抑制剂，提高或干扰巨噬细胞内miR-1275水平，分析miR-1275对Dil-ox-LDL脂质摄取能力的变化；通过油红O染色，分析miR-1275对细胞内脂质含量的影响。
结果：
(1)缺血性脑卒中人群外周血细胞miR-1275水平显著低于健康对照组(-6.45±1.56vs-5.62±2.10，P<0.001)，在校正年龄、性别、吸烟、高血压史、糖尿病史等传统危险因素后，发现miR-1275表达水平降低与IS发病风险增加显著相关。(校正后OR为0.76；95％CI为0.69-0.85；P<0.001)。
(2)受试者操作特性曲线评价miR-1275对IS的诊断价值发现，纳入miR-1275后，基线模型ROC曲线下面积从0.73(95％CI，0.70-0.78)，增加到0.76(95％CI，0.71-0.80)(P=0.004)；miR-1275能够对NRI为35.47%(95％CI，19.07％-51.88％，P<0.001)、IDI为0.04(95％CI，0.02-0.05，P<0.001)的患者重新分类。
(3)TargetScanHuman7.0预测ApoC2基因3UTR区具有潜在的miR-1275结合位点。将该区域DNA片段插入到报告基因载体psiCHECK2，通过双荧光素酶报告基因实验发现，miR-1275模拟物能显著抑制报告基因活性。使用模拟物(抑制剂)增强(干扰)THP-1来源巨噬细胞内miR-1275水平，通过定量RT-PCR检测，进一步证实了miR-1275对靶基因ApoC2表达的负调控。
(4)使用模拟物(抑制剂)增强(干扰)THP-1来源巨噬细胞内miR-1275水平，研究发现巨噬细胞对Dil-ox-LDL的摄取受到明显抑制(增强)；使用ox-LDL诱导THP-1来源巨噬细胞分化成泡沫细胞，通过油红O染色检测细胞内脂质含量变化时，发现miR-1275模拟物(抑制剂)能显著降低(提升)细胞内脂质含量。
结论：
(1)外周血细胞miR-1275水平的降低能显著增加中国人群罹患缺血性脑卒中的风险。
(2)血miR-1275联合传统危险因素能提高对缺血性脑卒中的预测能力。
(3)miR-1275通过负调控ApoC2基因，减少ox-LDL摄取，抑制泡沫细胞的形成，在缺血性脑卒中的发生发展过程中具有保护作用。
本研究旨在探明外周血细胞miR-1275与缺血性脑卒中(Ischemic Stroke，IS)风险的关联，并揭示miR-1275参与IS发病的生物学机制。
方法：
(1)病例对照研究：外周血细胞miR-1275水平与IS风险关联研究：纳入了2016年11月至2017年08月就诊于深圳市人民医院的缺血性脑卒中患者(病例组)及同时期在中山大学附属第八医院做常规健康体检的人群(对照组)各279例，两组性别及年龄构成匹配。采集研究对象肘静脉血5ml作为外周血样本，用于提取RNA。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)获得miR-1275表达水平，并以U6为内参，通过计算-?Ct获得相对表达量。通过调查问卷收集所有研究对象的一般资料、临床检验指标。采用两样本t检验或Mann-WhitneyU检验比较各变量的组间差异；计数资料的比较采用卡方检验；采用非条件Logistic回归分析miR-1275表达水平与IS之间关联；通过ROC曲线和重分类分析模型检验miR-1275对IS的预测价值。利用SPSS22.0软件对数据进行统计学分析。
(2)生物学机制研究：首先使用生物信息学软件TargetScanHuman对miR-1275潜在的靶基因进行分析预测。其次，构建报告基因质粒后，分别通过双荧光素酶报告基因实验和定量RT-PCR实验，验证miR-1275对下游靶基因的调控。最后，使用miR-1275模拟物及抑制剂，提高或干扰巨噬细胞内miR-1275水平，分析miR-1275对Dil-ox-LDL脂质摄取能力的变化；通过油红O染色，分析miR-1275对细胞内脂质含量的影响。
结果：
(1)缺血性脑卒中人群外周血细胞miR-1275水平显著低于健康对照组(-6.45±1.56vs-5.62±2.10，P<0.001)，在校正年龄、性别、吸烟、高血压史、糖尿病史等传统危险因素后，发现miR-1275表达水平降低与IS发病风险增加显著相关。(校正后OR为0.76；95％CI为0.69-0.85；P<0.001)。
(2)受试者操作特性曲线评价miR-1275对IS的诊断价值发现，纳入miR-1275后，基线模型ROC曲线下面积从0.73(95％CI，0.70-0.78)，增加到0.76(95％CI，0.71-0.80)(P=0.004)；miR-1275能够对NRI为35.47%(95％CI，19.07％-51.88％，P<0.001)、IDI为0.04(95％CI，0.02-0.05，P<0.001)的患者重新分类。
(3)TargetScanHuman7.0预测ApoC2基因3UTR区具有潜在的miR-1275结合位点。将该区域DNA片段插入到报告基因载体psiCHECK2，通过双荧光素酶报告基因实验发现，miR-1275模拟物能显著抑制报告基因活性。使用模拟物(抑制剂)增强(干扰)THP-1来源巨噬细胞内miR-1275水平，通过定量RT-PCR检测，进一步证实了miR-1275对靶基因ApoC2表达的负调控。
(4)使用模拟物(抑制剂)增强(干扰)THP-1来源巨噬细胞内miR-1275水平，研究发现巨噬细胞对Dil-ox-LDL的摄取受到明显抑制(增强)；使用ox-LDL诱导THP-1来源巨噬细胞分化成泡沫细胞，通过油红O染色检测细胞内脂质含量变化时，发现miR-1275模拟物(抑制剂)能显著降低(提升)细胞内脂质含量。
结论：
(1)外周血细胞miR-1275水平的降低能显著增加中国人群罹患缺血性脑卒中的风险。
(2)血miR-1275联合传统危险因素能提高对缺血性脑卒中的预测能力。
(3)miR-1275通过负调控ApoC2基因，减少ox-LDL摄取，抑制泡沫细胞的形成，在缺血性脑卒中的发生发展过程中具有保护作用。