鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)引起的,广泛分布于世界各个养鸭国家的,目前最重要的传染病之一。RA菌株的血清型众多,目前为止,共报道有21个血清型,各血清型之间无交叉保护。本实验室前期进行的血清学研究结果表明流行菌株的优势血清型是血清1、2和10型。然而,我们对于鸭疫里默氏杆菌的分子致病机制还知之甚少。本研究检测了鸭疫里默氏杆菌(RA)10个基因在不同菌株间的分布并进行序列分析,研究其在不同菌株中的保守性。研究发现了3个鸭疫里默氏杆菌的具有高度保守性的基因：lipid A、 luxE和tctR;6个可能的血清型相关基因：TR、luxE、IS1、tctR、luxrl和TA；以及5个可能的毒力相关基因：cwaH、lipid A、luxE、IS1和tctR。同时,发现luxE基因既可能与细菌的致病性相关,又可能与细菌的血清型相关。因此,我们进一步研究了该基因对RA的生物学特性影响。本文采用同源重组的方法来构建鸭疫里默氏杆菌Yb2株的luxE基因缺失株Yb2△luxE和luxE基因回复株cYb2△luxE。具体方法为：通过PCR扩增鸭疫里默氏杆菌Yb2株luxE基因上下游的侧翼序列和ompA启动子序列,并按OmpA-luxE Left-luxE Right的顺序连接至自杀性质粒pDS132。扩增壮观霉素抗性基因,最终构建得到重组自杀性质粒pDS132-ompA promoter-L-S-R。通过结合转移的方法将重组自杀性质粒导入鸭疫里默氏杆菌Yb2中,通过发生同源重组使luxE基因被Spc替换。用Spc抗性来筛选缺失突变株从而获得luxE基因缺失株Yb2△luxE。基因缺失株Yb2△luxE的互补菌株cYb2△luxE是使用穿梭表达载体pCP29进行构建。我们对Yb2株的LuxE基因缺失株Yb2△luxE生物学特性进行研究：通过测量两株细菌的生长曲线发现,基因缺失株Yb2△luxE的生长速度略慢于野生株Yb2；通过进行动物试验发现,缺失株YYb2△luxE对鸭的LDso比野生株Yb2低90倍；同时,用缺失株Yb2△luxE接种雏鸭24h时血液中的细菌载量显著低于野生株Yb2；另外,缺失株Yb2△luxE对Vero细胞的入侵能力显著低于野生株Yb2。综上所述,我们研究发现luxE基因为一个的重要的毒力相关因子。为鸭疫里默氏杆菌病致病机制的进一步研究奠定基础。