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目的绝经后骨质疏松症是目前中老年人常见的全身骨代谢性疾病。越来越多的研究提供的证据表明,绝经后骨质疏松症也发生在人的牙槽骨。中药丹参是中医临床上最为常用的中药之一,隐丹参酮是其特征性成分之一。本研究为明确隐丹参酮对破骨细胞形成的影响及作用机制,选取骨质疏松小鼠作为动物模型,探索隐丹参酮用于防治破骨细胞过度活化所造成的牙槽骨绝经后骨质疏松症的效果。方法在本研究中,体外分离培养小鼠骨髓单核细胞(BMMS)和单核巨噬细胞系(RAW264.7细胞系)定向分化为破骨细胞,利用CCK-8、流式细胞术观察隐丹参酮对破骨细胞增殖及凋亡的影响;利用TRAP染色和骨片吸收明确隐丹参酮对破骨细胞分化和骨吸收功能的影响;利用免疫荧光、Western Blot及PCR等技术动态观察隐丹参酮在破骨细胞分化过程中对基因、蛋白水平变化的影响情况并明确作用机制。体内选取3月龄的雌性C57BL/6J小鼠作为实验动物。通过双侧卵巢摘除术(OVX)方法,建立骨质疏松小鼠模型。在隐丹参酮药物干预期间,应用双色荧光标记观察骨矿化速率,并采集小鼠血清和上颌牙槽骨进行Micro-CT分析、共聚焦显微镜扫描、苏木素伊红染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色、酶联免疫吸附实验等检测,在组织学水平分析隐丹参酮对牙槽骨的影响。结果在体外试验中发现,隐丹参酮在药物浓度为6.25μM时即对细胞的增殖表现出明显的抑制作用,半数抑制剂量为16.54μM。在0.8μM、1.57μM和3.125μM的安全浓度范围内,隐丹参酮明显抑制破骨细胞形成数量和大小(p<0.01),减少了骨吸收面积(p<0.01)。并下调TRAP、Cathepsin K、Calcitonin receptor、DC-STAMP、c-fos、NFATC1、V-ATPase a3、V-ATPase d2等破骨细胞特异性基因的表达,阻断JNK/MAPKs信号通路。在骨质疏松小鼠模型建立实验中发现,相比于Sham组,OVX组骨体积分数、骨小梁厚度和数目减小(p<0.01),促进骨小梁分离度增大(p<0.05);相较于OVX组,隐丹参酮干预后,骨体积分数、骨小梁厚度和数目明显增加(p<0.01或p<0.05),骨小梁分离度明显降低(p<0.01或p<0.05)。且其效果呈剂量依赖性,High组效果明显优于Low组,并与ZOL组效果相似甚至更佳。结论(1)隐丹参酮是通过阻断JNK/MAPKs信号通路来抑制破骨细胞的形成;(2)本研究提示隐丹参酮可以防治绝经后骨质疏松症小鼠的牙槽骨骨丢失,从而为临床上牙槽骨发生骨质疏松性骨吸收的治疗提供新的思路和方法。