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生命科学的发展对现代分析化学提出了更高、更新的要求,比如要求高的灵敏度、快的分析速度以及分析方法的简便性等。另一方面,生命科学研究也越来越深入,甚至希望从分子水平上了解生命过程的本质。尤其是基因组学、蛋白质组学、代谢组学、糖组学等组学的兴起,为人们针对这些复杂样品或生物体系而开展的分析研究提出了更严峻的挑战。因而,生物分子(氨基酸、肽、蛋白质、核酸和糖等)的分析与检测研究越来越成为人们热衷的主题。本论文利用质谱、荧光、高效液相色谱等有效的分离、分析手段,开展了几种生物分子(如肽、唾液酸)的标记与检测研究,并取得了如下主要研究成果:
1.以7-甲氧基香豆素-3-羧基-N-琥珀酰亚胺酯(MCSE)作为衍生试剂,并借助高效液相色谱、荧光和质谱等仪器分析手段,开展了三种神经肽(甲硫脑啡肽,亮脑啡肽和神经紧张素)的标记与分析研究。在优化的反应条件下,MCSE可对这三种肽进行标记;标记产物的荧光分析波长与天然的肽相比有了大幅度的增长,从而有助于消除生物基体中其它物质的干扰,为其准确、灵敏的测定提供了基础。
2.将马来酰亚胺基团与含有正电荷的季铵盐基团联用,设计合成了一种新的、适用于含巯基化合物的标记并改善其质谱信号响应的试剂,溴化-1-[3-(4-马来酰亚胺基苯氧基)丙基]三甲铵(MPPTAB)。以谷胱甘肽作为模型化合物优化了标记反应的条件,并研究了MPPTAB对具有不同极性的含巯基的肽的标记性能。结果表明,这种标记可显著地提高巯基肽的质谱检测能力,其中尤以极性比较弱的肽为巨,检测信号可以提高100倍。该方法可望用于低含量的巯基肽的检测。
3.唾液酸是含有邻二羰基的一类化合物(可由环转化而来)。利用它可与邻二氨基萘偶联生成苯并喹喔啉类衍生物,初步开展了它的ESI-LC-MS分析研究。