【摘 要】
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[目的]脊髓损伤是一种创伤性的神经系统疾病,损伤后可导致运动、感觉和自主神经功能发生不同程度的功能障碍,严重者可累及呼吸、泌尿等系统,甚会至危及患者的生命,且这些病理改变往往是长期存在的,这不仅会给患者本人带来身体和心理上的严重损伤,还会对其整个家庭、社会和国家造成巨大的经济负担。据世界卫生组织统计,全球每年脊髓损伤患者大约有25-50万,且发病率成逐年增加的趋势,但针对脊髓损伤患者的治疗却仍没有
【基金项目】
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国家自然科学基金(81760648); 国家自然科学基金(31670776); 云南省应用基础研究昆明医科大学联合专项(2019FE001 (-162)、20I9FE001 (-183)、2019FE001(-206)); 云南省神经系统疾病诊疗中心应用研究基金(ZX2019-03-0
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[目的]脊髓损伤是一种创伤性的神经系统疾病,损伤后可导致运动、感觉和自主神经功能发生不同程度的功能障碍,严重者可累及呼吸、泌尿等系统,甚会至危及患者的生命,且这些病理改变往往是长期存在的,这不仅会给患者本人带来身体和心理上的严重损伤,还会对其整个家庭、社会和国家造成巨大的经济负担。据世界卫生组织统计,全球每年脊髓损伤患者大约有25-50万,且发病率成逐年增加的趋势,但针对脊髓损伤患者的治疗却仍没有任何一种专一有效的治疗药物。因此,探索新型脊髓损伤治疗药物具有重要的意义。课题组在前期工作中从两栖动物的皮肤分泌物中鉴定出一种名为OM-LV20的新型天然活性多肽,其具有显著的促皮肤组织再生能力和神经保护作用,结合OM-LV20表现出来的活性和特点,我们将该肽应用到脊髓损伤的治疗研究,观察活性肽OM-LV20对急性脊髓损伤大鼠组织结构和运动功能恢复的影响。[方法]构建SD大鼠脊髓全横断损伤模型,并将其分为空白对照组、假手术组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(MPED)和样品组(OM-LV20),分别腹腔给药治疗后使用Basso-Beattie-Bresnahan行为学评分量表观察各组大鼠后肢的运动表现;并在术后28天将大鼠安乐死,分别取出不同组的大鼠损伤脊髓组织进行病理切片,通过H&E染色、尼氏染色、免疫组织化学染色观察损脊髓组织结构的恢复情况;同时在术后28天我们通过ELISA试剂盒检测了BDNF的表达情况;在急性期48小时则是通过根据GSH、SOD、MDA、NOx试剂盒分别进行检测它们的含量来观察急性期脊髓局部微环境的变化情况。[结果]成功稳定的构建了成年SD大鼠脊髓全横断损伤模型;通过行为学BBB评分量表可以观察到术后脊髓全横断大鼠运功功能均完全丧失,随着术后时间的增加,大鼠后肢运动能力得到不同程度的恢复,但都不能得到完全恢复,值得注意的是其中MPED组和活性肽OM-LV20组的大鼠后肢运动功能恢复明显好于生理盐水组,并且具有统计学意义,但由于阳性对照组甲基强的松龙的毒副作用使得大鼠死亡率和体重均远远低于活性肽OM-LV20组和生理盐水组;通过病理学切片染色显示,全横断大鼠各组损伤部位脊髓组织均存在明显的缺损,并且可以看到损伤部位存在大量的神经胶质瘢痕,不过相对于生理盐水组,MPED组和活性肽OM-LV20组的组织缺损明显较少,存活的神经元细胞也较多,且BDNF的表达也明显增多,解剖标本初步直观确定OM-LV20组脊髓损伤部位继发性损伤明显减少,同时病理切片H&E染色显示OM-LV20组损伤局部缺损明显减小,尼氏染色显示OM-LV20组存活神经元胞体数目明显增加;生物化学检测SOD的检测结果显示活性肽OM-LV20组相对于生理盐水组明显升高,而相反的指标MDA相对于生理盐水组,活性肽OM-LV20组的含量却非常低;同时发现,OM-LV20相对于生理盐水组GSH表现出较高的含量,而NOX含量却相对较低。[结论]大鼠脊髓全横断损伤发生后,在损伤急性期使用活性肽OM-LV20进行治疗,可明显改善脊髓损伤局部微环境,而脊髓微环境的状态对继发性损伤具有重要的影响。因此,活性肽OM-LV20的应用可在急性期改善损伤局部微环境,进而减轻继发性的损伤,从而起到神经保护作用,同时,由于活性肽OM-LV20的治疗使得损伤部位脊髓的结构和大鼠后肢运动功能得到明显的改善。
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