不同浓度K+和血清对时钟基因以及C2C12细胞增殖的影响

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:n19851020
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究目的:生物节律和成肌细胞增殖对运动训练具有十分重要的意义。小鼠C2C12成肌细胞的增殖受到胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)和钾离子(K+)等许多理化因素的影响。本文研究了FBS和K+对C2C12细胞增殖与时钟基因周期基因2(Period2,Per2)、Cyclin D1和第三类组蛋白去乙酰化酶1(sirtuin1,Sirt1)的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达的影响。  研究方法:50%马血清处理细胞2h,使时钟基因的mRNA表达同步化,而后分别更换不同FBS和K+浓度培养基。  1.不同FBS浓度分别为0%、2.5%和10%。葡萄糖(glucose,Glu)浓度为22.5 mM。  2.不同K+浓度处理分为九组,包括三个K+浓度和三个Glu浓度:①22.5mM Glu组;②22.5 mM Glu+50 mM K+组;③22.5 mM Glu+100 mM K+组;④90 mM Glu组;⑤90 mM Glu+50 mM K组;⑥90 mM Glu+100 mM K+组;⑦180 mM Glu组⑧180 mM Glu+50 mM K+组⑨180 mM Glu+100 mM K+组。  用噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium brom-ide assay,MTT)法进行细胞增殖检测。不同氯化钾(KCl)浓度实验组每隔6h进行一次MTT法检测细胞增殖,至72 h结束;不同FBS浓度处理组每隔24 h进行一次MTT法检测细胞增殖,至192 h结束。96 h时用RNAiso Plus收取不同FBS浓度处理聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)样品,而后检测时钟基因Per2、Cyclin D1和Sirt1的mRNA表达。  研究结果:  1.在22.5 mM、90 mM、180 mM三个Glu浓度下,0mM K+的细胞增殖均显著性地高于50mMK+和100 mM K+的增殖(P<0.01)。50 mM K+的细胞增殖均显著性地高于100mMK+的增殖(P<0.01)。  2.48h开始,0%FBS组增殖极显著性地低于2.5%FBS和10%FBS组(P<0.01)。72 h开始,2.5%FBS组增殖极显著性地低于10%FBS组(P<0.01)。192 h时,与24 h相比,0%FBS组OD值减小了接近3倍。  3.0% FBS组的Per2表达极显著性地高于2.5%FBS和10%FBS组(P<0.01)。2.5%FBS组的Per2表达和10%FBS组没有显著性差异。  4.0% FBS组的Sirt1表达显著性地高于2.5%FBS组(P<0.05)和10%FBS组(P<0.01)。2.5%FBS组的Sirt1表达显著性地高于10%FBS组(P<0.05)。  5.0% FBS组的Cyclin D1表达显著性地低于2.5%FBS组口<0.05)和10%FBS组(P<0.01)。2.5%FBS组的Cyclin D1表达显著性地低于10%FBS组(P<0.05)。  研究结论:  1.在22.5 mM、90 mM、180 mM三个Glu浓度下,与0 mMK+组相比,50mMK+和100 mM K+可以显著性地抑制C2C12细胞的增殖。  2.从0、2.5%到10% FBS,细胞的增殖随着FBS浓度的增大而提高。  3.时钟基因Per2参与调控了C2C12细胞的增殖,在C2C12细胞对抗FBS应激时发挥了十分重要的作用。C2C12细胞的增殖失调时,Per2的mRNA表达显著性地升高。从0%、2.5%到10%浓度,随着FBS浓度的升高,Sirt1的mRNA表达逐渐降低,CyclinD1的mRNA表达逐渐升高。不同浓度FBS对细胞增殖可能是通过Per2、Sirt1和CyclinD1基因来介导的。
其他文献
汉字与民间剪纸都是中华民族优秀的文化艺术遗产。汉字图形以剪纸形式被民间艺人加以绝伦的设计,在表现手法具有浓郁的装饰性,本文将探寻汉字与民间剪纸的融合而产生的造型方
2016年12月23日,环境保护部与国家质量监督检验检疫总局联合发布《轻型汽车污染物排放限值及测量方法(中国第六阶段)》,并公布了第六阶段轻型汽车的排放要求和实施时间:自2020年7月1日起,所有销售和注册登记的轻型汽车应符合该国Ⅵ标准要求。自2020年7月1日起,该标准替代《轻型汽车污染物排放限值及测量方法(中国第五阶段)》(GB18352.5-2013)。本标准自发布之日起,即可依据本标准进行
期刊
电子白板的教育应用为技术与教学的融合提供了更大可能,促使教学媒体产生异质、多样化的整合和融合,包括电子白板工具软件、数字化多媒体素材、CAI课程套件、网际网络超文本、
研究目的:  高原训练对于机体提高有氧耐力水平,提升运动成绩具有显著的作用,同时,高原训练也会对心肌结构、功能等方面产生影响。本研究旨在探讨补充FDP对于高原训练期自行车
自信(Confidence)是个体对自身诸方面的肯定程度,是对自己能力、价值作出客观、正确认知与评价的一种稳定性格特征。编制一份适合中国国情的新生代农民工自信问卷,并考察当下
米歇尔·康·阿克曼:在一次与武艺、刘庆和、李津、田黎明的对话中,你表达出,水墨就一种技术和材料的问题,比如人物画家,跟画人物的油画家从根本上来说没有很大的区别。我倒
龙山文化上承大汶口文化,距今约4600年,是中国古代文化的重要组成部分。黑陶艺术是民族文化与艺术的融合,其独特的造型将“土与火”锤炼成艺术精品。本文将从黑陶艺术系统特
在当今网络时代,伴随着网络学习及学习社群的普及,网络学习社群得到愈加广泛的使用。目前各种学习理论也在不断的分化和整合,联通主义作为一种网络时代的学习观,在学习的外部联结
在介绍新福瑞迪之前我们先将时间的指针拨回2002年末,在当时,起亚这个品牌在国内的知名度远不及丰田、本田,甚至马自达.然而一款名为千里马轿车的问世让国人开始真正了解这个
目前国内的汽配经营市场发展潜力巨大,同国外汽配经营行业相比较,国内汽配经营部门数目过大,规模却太小,而且分布过于分散。这样导致各个经营部门资金投入不足,经营产品的品