【摘 要】
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研究利用化学方法制备了一种30nm大小、分散均匀的磷酸钙纳米颗粒,在经不同浓度的氯化钙等试剂修饰后,能与质粒DNA有效结合形成复合体,该复合体能吸附在细胞膜上,然后进入细
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研究利用化学方法制备了一种30nm大小、分散均匀的磷酸钙纳米颗粒,在经不同浓度的氯化钙等试剂修饰后,能与质粒DNA有效结合形成复合体,该复合体能吸附在细胞膜上,然后进入细胞内,增加进入细胞内DNA量,提高基因转染的效率,并且该复合体能有效的抵抗血清中酶类对DNA分子的降解,有效的保护DNA分子的完整性;用绿色荧光蛋白(GFP)基因作报告基因,与经氯化钙修饰的磷酸钙纳米颗粒结合后转染常规培养的CNE-2细胞,HT1080细胞,在荧光显微镜及电子显微镜下观察发现GFP基因在各细胞内得到了高效的表达,同时,我们用裸鼠制备了鼻咽癌肿瘤动物模型,将纳米与绿色荧光蛋白(GFP)的复合物直接瘤内注射,结果发现以该纳米为载体介导的基因在动物体内也有很好的表达效率.我们的实验表明磷酸钙纳米颗粒体积小、可以在血管中随血液循环;经修饰后能与DNA结合、提高细胞转染效率;并且在动物体内也能有效的表达,少量的磷酸钙颗粒对细胞无毒;所以磷酸钙纳米颗粒有可能成为一种新型基因转染载体.
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