乙肝转阴散在恩替卡韦分散片治疗乙型肝炎肝硬化过程中的作用及其机制研究

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【目的】观察乙肝转阴散联合恩替卡韦分散片治疗乙肝肝硬化患者(代偿期)的临床疗效,并通过观察乙肝转阴散对肝纤维化大鼠的保护作用及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶信号通路在肝纤维化大鼠肝组织的变化情况,探讨乙肝转阴散抗肝纤维化的作用机制所在。【方法】一、临床研究选取乙型肝炎肝硬化患者(代偿期)为观察对象,随机分为对照组和治疗组。对照组予恩替卡韦分散片口服治疗,治疗组在对照组的基础上,配合乙肝转阴散治疗,两组观察疗程均为6个月。疗程观察内容包括两组患者的症状体征及肝功能、肝纤四项、腹部B超、HBV-DNA定量、HBe Ag血清学转阴情况及安全性指标。二、实验研究方法:予SD雌性大鼠腹腔注射四氯化碳以制备肝纤维化大鼠模型。将大鼠先随机分为空白组、模型组大鼠、乙肝转阴散低剂量组、乙肝转阴散高剂量组。空白对照组和模型对照组灌服纯净水;中药高剂量组灌服乙肝转阴散0.508g/100g;中药低剂量组灌服乙肝转阴散0.12g/100g,每天1次。实验结束时检测各组大鼠血清肝功能、肝纤维化指标情况;HE染色观察肝组织病理学改变;免疫组织化学技术及Western blot检测肝组织中PI3K/Akt信号通路中关键分子Akt1、磷酸化Akt1的表达变化;应用TUNEL法检测肝星状细胞(HSC)凋亡情况。【结果】一、临床研究两组患者治疗后在肝功能、肝纤四项、腹部B超、HBV-DNA定量较治疗前比较,均得到改善(P<0.05)。治疗组的总体疗效、HBe Ag血清学转阴有效率均优于对照组。两组治疗后,治疗组肝功能ALT、AST指标、肝纤四项指标、腹部B超分别与对照组进行组间比较,显示有统计学差异(P<0.05)。两组患者治疗期间均未出现不良反应。二、实验研究结果:1、与空白组对比,模型组AST、ALT、TBIL、HA、PC-III、IV-C、LN含量均升高,ALB含量下降(P<0.05);与模型组比较,乙肝转阴散高剂量组、乙肝转阴散低剂量组AST、ALT、TBIL、HA、PC-III、LN含量均降低,ALB含量升高(P<0.05);与乙肝转阴散低剂量组比较,乙肝转阴散高剂量组AST、ALT、TBIL、HA、LN含量降低,ALB含量升高(P<0.05)。2、HE染色病理结果显示模型组的肝纤维化程度最重,乙肝转阴散低剂量组及高剂量组随着剂量升高,纤维化程度逐渐减轻。3、与空白组比较,模型组大鼠肝组织中Akt1、磷酸化Akt1的表达均增加(P<0.05);乙肝转阴散灌胃干预治疗后的高剂量组大鼠的肝组织中Akt1、p-Akt1阳性表达较模型组、乙肝转阴散低剂量组均明显减少(P<0.05)。4、同时,TUNEL法检测各组肝星状细胞凋亡情况,结果显示乙肝转阴散高剂量及低剂量组大鼠肝组织中HSC凋亡率高于模型组(P<0.05),且乙肝转阴散高剂量组大鼠肝组织中HSC凋亡率高于低剂量组(P<0.05)。【结论】乙肝转阴散联合恩替卡韦分散片治疗乙型肝炎肝硬化患者(代偿期),可有效提高患者的临床疗效和恩替卡韦分散片抗乙型肝炎病毒的应答率,从而延缓代偿期肝硬化患者向失代偿期肝硬化进展。同时,治疗组较对照组在恢复患者肝功能、改善肝纤维化指标及缩小门静脉主干内径、脾脏厚度等作用上,更具有突出疗效且安全性好。而PI3K/Akt信号通路在肝纤维化的发生发展过程中发挥重要作用,通过实验研究发现,乙肝转阴散能改善肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标,并可通过抑制该PI3K/Akt信号通路的激活及促进HSC的凋亡来发挥其抗肝纤维化的作用机制。
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