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目的:放疗是头颈部恶性肿瘤的有效治疗方法之一,但由于唾液腺位于头颈部,因此头颈部恶性肿瘤放射治疗时,唾液腺可受到电离辐射而导致其功能下降,从而带来一系列并发症,如猖獗龋、吞咽及发声困难、口腔粘膜病变等,使患者生活质量下降。目前虽然学者们对放射性唾液腺损伤的发生机制进行了大量研究,提出了许多可能的机制,但目前仍无确切定论。蛋白激酶C(protein kinase c,PKC)广泛存在于神经细胞、平滑肌细胞和唾液腺细胞中,可调控大电导率钙离子激活型钾离子通道(Large-Conductance Ca2+-Activated K+Channels,BK),抑制K+的跨膜转运,且在细胞的凋亡过程中发挥着重要作用。本研究对大鼠下颂下腺及人源唾液腺细胞系进行一次性15GyX射线照射,观察照射后不同时间大鼠下颂下腺组织及唾液腺细胞内蛋白激酶C(protein kinase c,PKC)的蛋白表达水平及分布变化,探讨PKC在唾液腺放射损伤中发挥的作用。方法:体重约200-250g的雄性Wistar大鼠共48只,随机分为对照组和照射组,一次性15Gy X射线对大鼠下颂下腺区局部照射,对照组只行麻醉不照射,照射前后对大鼠体重进行称量并记录。照射后1天、3天和30天分别处死大鼠,取两侧下颂下腺组织,称重,一侧下颂下腺放入4%多聚甲醛固定、石蜡包埋组织、切片,HE染色,光镜下观察照射后大鼠下颂下腺组织学变化,免疫组化染色,观察照射后大鼠下颂下腺组织中蛋白激酶C(protein kinase c,PKC)表达变化。另一侧下颌下腺组织加裂解液进行冰上研磨,采用Western Blot蛋白印迹法检测各组大鼠下颌下腺组织中PKC蛋白表达水平。体外培养人源唾液腺细胞系,随机分为4组,对照组两组,24小时对照组,48小时对照组;照射组两组,照射后24小时组和48小时组。一次性给予照射组细胞15GyX射线照射,照射后培养细胞24小时、48小时。4%多聚甲醛进行固定,免疫组化染色,观察照射后PKC在细胞中的表达变化。结果:(1)PKC主要表达在大鼠下颌下腺腺泡细胞中,照射后1天、3天、30天大鼠下颌下腺组织中PKC表达量升高,具有显著性差异。PKC的表达量随时间的增长呈逐渐递增趋势,且差异明显。(2)PKC在人源唾液腺细胞系中主要分布在胞浆中,照射后PKC表达量升高。结论:PKC主要分布在大鼠下颌下腺腺泡细胞和人源唾液腺细胞系胞浆中,照射后PKC表达量升高,推测照射后唾液腺功能降低,可能与PKC表达量升高抑制BK通道和促进细胞凋亡有关。