研究目的:
　　探讨3,4-苯并[a]芘(Bap)促进腹主动脉瘤(AAA)形成的分子机制。
　　研究方法:
　　1.体内实验：随机将C57/B6j小鼠（6-8月龄，雄性）随机分成以下几组(n=12)：①空白对照组：无处理；②中链三酸甘油脂油组（BaP溶媒）；③AngⅡ+BaP组：AngⅡ0.72mg/kg体重/天，BaP10mg/kg体重/周；AngⅡ给药依赖于渗透泵。计算AngⅡ浓度并准备AngⅡ溶液，将溶液注入泵中，37℃水浴12小时。动物麻醉后，刮除植入处的皮肤并消毒。在肩胛骨中部皮肤做一切口，将渗透泵埋入皮下组织中，并用缝合线缝合切口。将BaP溶于浓度为2mg/ml的中链甘油三脂中。每周按10mg/kg的剂量向小鼠腹腔内注射BaP；④AngⅡ+BaP+氯喹（CQ）组：AngⅡ0.72mg/kg体重/天，BaP10mg/kg体重/周,CQ50mg/kg体重/天。
　　2.体外实验：将RAW264.7单核巨噬细胞分为正常对照组，Bap组（20μM），Bap（20μM）+CQ（20μM）组，检测细胞自噬相关蛋白、炎症小体和炎症因子相关蛋白。应用免疫印迹及细胞免疫荧光法检测Bap对体外培养的RAW264.7单核巨噬细胞自噬相关蛋白、炎症小体和炎症因子相关蛋白。
　　研究结果:
　　1.组织免疫荧光显示，在Bap/AngⅡ诱导的AAA中炎症小体激活。与对照组相比，模型组NLRP3和IL-1β的表达明显增加。
　　2.组织免疫荧光显示，在Bap/AngⅡ诱导的小鼠AAA中自噬水平增强。与对照组相比，模型组LC3的表达明显增加，说明模型组的自噬水平增强。
　　3.蛋白质免疫印迹分析与细胞免疫荧光显示，在Bap诱导的RAW264.7细胞中炎症小体激活和自噬水平增强。与对照相比，Bap组NLRP3和IL-1β蛋白量的明显上调，结果表明，Bap诱导了RAW264.7细胞炎症小体的激活和相关炎症因子的表达。同时，与对照相比，Bap组LC3Ⅱ蛋白量的明显上调和P62蛋白量的明显下调，说明Bap作用后，RAW264.7细胞中的自噬流更通畅。细胞免疫荧光结果显示，与对照组相比，Bap组细胞的LC3和IL-1β显著上升。这些研究结果表明Bap可诱导RAW264.7细胞炎症小体激活和自噬水平增强。
　　4.形态学结果显示，CQ可引起AAA小鼠死亡率和动脉瘤直径的增加。与模型组相比，CQ组的腹主动脉的最大直径显著增加。
　　5.蛋白质免疫印迹分析结果显示，CQ可增加Bap暴露的RAW264.7细胞炎症小体的产生。与Bap组相比，Bap+CQ组LC3Ⅱ、P62蛋白表达明显上升，说明自噬流不通畅，而且，NLRP3、IL-1β蛋白表达上升，说明自噬流不通畅时炎症小体产生增加，更说明自噬为保护性反应，即炎症小体相关的选择性自噬受抑制。
　　6.mRNA芯片热图分析结果显示，Bap暴露的RAW264.7细胞中，Edn1表达升高。PCR结果显示与对照组相比，Bap组Edn1的表达明显增加；蛋白质免疫印迹及细胞免疫荧光结果显示验证基因Edn1的表达，与对照组相比，Bap组ET-1蛋白的表达水平明显升高。
　　7.组织免疫荧光结果显示，在AAA中巨噬细胞浸润和ET-1表达升高。与对照组相比，CD68和ET-1的表达明显升高。
　　8.蛋白质免疫印迹分析结果显示，Bap诱导的自噬及炎症受Edn1的调节。与病毒对照组相比，敲减Edn1后，ET-1、P62、NLRP3和IL-1β的表达都明显降低，说明敲减ET-1后，自噬增强且炎症受到抑制。
　　研究结论:
　　本研究证实，Bap可通过上调巨噬细胞ET-1的表达,进而抑制自噬，激活血管炎症小体的表达，从而促进AAA的发生和发展。