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表面等离子体共振成像(surface palsmon resonance imaging,SPRI)技术是一种潜在的多功能高通微量分析方法。本论文为发展新的SPRI方法而展开系统的研究,成功建立了彩色表面等离子体共振成像(color SPRI,CSPRI)方法,并取得如下成果:
(1)采用角度一波长共轭双调模式设计搭建了CSPRI系统。利用多波长光作激发光源,彩色CCD为检测器,实现了样品(包括单一样品和点阵样品)的彩色成像检测。
(2)研究了传感膜的制作方法。制备了去甲万古霉素修饰的SPR传感膜,并用于氨基酸的手性识别。发现该传感膜对D-、L-蛋氨酸有良好的手性识别作用。采用直接点样法探讨了用于CSPRI的芯片点阵的构筑方法。
(3)利用CSPRI系统,结合芯片点阵技术,开展了蛋白质点阵性质的研究。首次检测到蛋白点阵的彩色图像,并且发现在相同的光入射角时,蛋白样品的图像色彩不仅和蛋白样品的类型而且和其浓度有关。结合SPR光谱技术研究了样品的图像色彩及其变化的原因。根据图像色彩的变化,成功检测了免疫球蛋白IgG点阵的抗原抗体相互作用。
(4)对样品图像的彩色信号进行了定量研究。以系列乙醇水溶液为模型,基于色度学基本原理,研究了样品的图像色彩和浓度之间的关系。结果表明,20℃时,在体积浓度为5.00-60.00%的范围内,乙醇水溶液体积浓度和其图像的色彩亮度呈线性关系,线性相关系数可达0.9981。利用该方法进行了实际样品的分析检测,并进一步用于点阵样品的定量分析,发展了CSPRI方法的定量检测能力。