板栗内生真菌资源与板栗干腐病生物防治研究

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植物内生真菌是指在某一时期生活在植物体内,但对寄主植物组织并不引起明显病害症状的真菌。近些年来,植物内生真菌由于能够产生丰富多样的具有多种生物活性的次生代谢产物,在自然界中具有重要的生态学作用,受到了全世界的广泛关注并取得了极大进展。植物内生真菌在植物病虫害防治、医药生产、人类疾病的治疗等方面有巨大的潜力。板栗是我国的重要的经济树种,分布广,栽培面积大,在国民经济中占有重要地位。板栗干腐病是板栗贮藏期常发生的病害之一,严重影响板栗的质量。因此,板栗干腐病的防治具有十分重要的意义。对于它的防治研究颇多,而利用板栗内生真菌进行干腐病的生物防治尚未报道。为了了解板栗内生真菌种群的组成,微生态功能以及在其生长发育过程中所产生的重要代谢物,为板栗内生真菌资源的利用与开发提供理论依据,进而研究选用生物防治解决板栗的储藏问题。笔者在豫南板栗园选择8个板栗园样地,对板栗各器官栖居的内生真菌种类进行了调查,对它们的生物学功能进行了实验,对一些真菌的代谢物进行逐步的研究。结果表明,该区板栗内生真菌种类丰富,这些真菌大多由子囊菌与半知菌构成,从板栗各组织中共分离获得内生真菌339株,初步鉴定发现分别为拟茎点霉(Phomopsis sp.)链格孢菌(Alternia sp)青霉属菌(Penicillium spp.)曲霉属菌(Aspergillus spp.)等属的菌种。不同板栗园板栗树内生真菌群落结构不同,这与板栗园的生态环境有关;不同的板栗树器官,其内生真菌的种类不同,叶片内生真菌种类最多,种子和木质部没有或极少有内生真菌存在,板栗树同-器官不同组织的内生真菌种类也不同。通过研究板栗干腐病菌与内生真菌B2、P1及C1的互作效应,观察菌丝生长形态和称量菌丝干重,实验表明其中4种菌株的代谢物对病原菌有明显的抑制作用,内生真菌B2、P1、C1的菌丝萃取物对病原菌有明显抑制作用。以菌丝体生物量为主要指标,在25℃下以120r/min的摇床速度,通过单因素实验确定了板栗两种树栖B2和病原菌液体培养适宜的碳源、氮源、最适pH。研究表明B2的最适碳源是葡萄糖,最适氮源是酵母膏,最适pH是5.0;病原菌D1的最适碳源是蔗糖,最适氮源是蛋白胨,最适PH是6.2。B2最适固体培养基是料①,病原菌D1的最适固体培养基为料②。最适培养温度为21-27℃;100ml/(250ml)分液量,120r/min的转速有利该菌的生长。
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