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目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂Tyrphostin AG1478对人脑胶质瘤U87细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞侵袭和迁移能力的影响,观察AG1478对人胶质瘤U87细胞化学治疗敏感性的影响,并探讨AG1478对胶质瘤细胞生物学行为影响的相关机制,为AG1478作为一种新的肿瘤治疗药物在控制人胶质瘤细胞生长、侵袭、转移和化学治疗增敏的应用上提供实验基础和理论依据。 方法:(1)应用MTT(噻唑蓝)比色法检测不同浓度AG1478和AG1478联合CDDP作用于体外培养的人脑胶质瘤U87细胞24h和48h后的细胞生存率。(2)流式细胞仪检测不同浓度AG1478和AG1478联合CDDP作用于体外培养的人脑胶质瘤U87细胞24h和48h后细胞周期分布和细胞凋亡的影响。(3)Transwell小室体外侵袭实验检测AG1478对人脑胶质瘤U87细胞体外侵袭和转移能力的影响。(4)明胶酶谱法检测AG1478对人脑胶质瘤U87细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达水平的影响;(5)Western印迹法检测CDDP和AG1478对人脑胶质瘤U87细胞EGFR信号通路分子蛋白(EGFR/p-EGFR、AKT/p-AKT、ERK/p-ERK)以及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。 结果:(1)AG1478明显抑制体外培养的人胶质瘤U87细胞增殖,并呈时间和浓度依赖性,并可以阻断EGF促进人胶质瘤 U87细胞增殖的作用。(2)AG1478可以诱导人胶质瘤U87细胞发生凋亡;阻滞细胞于G0-G1期,呈浓度依赖性。(3)AG1478可以抑制人胶质瘤U87细胞体外侵袭和迁移能力。(4)AG1478抑制人胶质瘤U87细胞p-EGFR/EGFR、p-AKT/AKT、p-ERK/ERK、MMP-2、MMP-9和CyclinD1蛋白的表达。(5)CDDP具有EGF促进人胶质瘤U87细胞EGFR、ERK和AKT蛋白磷酸化的作用,AG1478可以阻断EGF和CDDP对人胶质瘤U87细胞EGFR信号通路分子活化的作用。(6)AG1478通过增加S期细胞数和抑制CDDP活化人胶质瘤U87细胞EGFR信号通路活化而增强CDDP对胶质瘤细胞生长的抑制作用。 结论:AG1478通过诱导人胶质瘤U87细胞凋亡,阻滞细胞周期进程,阻断细胞EGFR信号传导通路、下调MMP-2、MMP-9和CyclinD1蛋白的表达来抑制体外人胶质瘤U87细胞增殖、侵袭和转移能力,AG1478还增强人胶质瘤U87细胞对CDDP的化学治疗的敏感性,有望成为人胶质瘤靶向治疗和提高化学治疗疗效的新药物。