三株南海红树林内生真菌次级代谢产物研究

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海洋复杂多变的环境导致了海洋微生物的多样性。海洋微生物因其特殊的生存环境而具有产生新型生物活性物质的巨大潜力。近年来,从海洋真菌中分离鉴定了许多结构新颖的次级代谢产物,这些化合物显示了良好的抗肿瘤、抗细菌或抗真菌等生物活性,为新药的开发和各种疑难疾病的治愈提供了新的希望。 本论文主要分成两个部分,第一部分(第1章)综述了海洋微生物次生代谢产物的最新研究情况。第二部分(第2到第4章)系统研究了来自中国南海红树林的三种内生真菌(ZH116,1403#,ZH51)的次级代谢产物。从以上3种南海红树林真菌的培养液及菌体中,分离得到了29个化合物,并通过UV、IR、NMR、MS等方法鉴定了这29个化合物的结构,其中三个是新化合物,1个化合物是首次从自然界分离得到的,同时还得到一个新的单晶。 论文的第2章,研究了采自珠海琪澳岛的红树林内生真菌ZH116的次级代谢产物。通过实验室发酵培养,反复柱层析,制备薄层层析,重结晶纯化,共得到了8个化合物,其中有三个是香豆素和异香豆素类化合物,它们分别是4-acetyl—6,8-dihydroxyisochroman-1-one(2-1),3,7-dihydroxy—9-methoxy-1-Methyl—6H—benzo[c]chromen—6-one(2-2),6,8-dihydroxy—3-methyl-1 H—isochromen-1-one(2-3),环脯—异亮肽(2-4),麦角甾醇(2-5),三羟基麦角甾醇(2-6),尿嘧啶(2-7),胸腺嘧啶(2-8)。在实验过程中,首次得到了化合物(2-1)的单晶。 论文的第3章,研究了南海红树林内生真菌1403#的次级代谢产物。经过分离纯化,通过波谱分析和理化常数对照,一共得到了13个化合物,其中(3-1)和(3-2)是新化合物。这13个化合物是1,4,6,7,9-pentahydroxyl—2-methoxy—7α—methyl—5αβ,6α,8αβ,8aβ,9α,10aα—hexahydroanthracen-10-one(3-1),4-hydroxy—2,6,7-trimethoxy—6—methyl—3H—spiro[benzofuran—2,1-cyclohex[2]ene]—3,4—dione(3-2),灰黄霉素(3-3),去氯灰黄霉素(3-4),1,4,5,6,7,9-hexahydroxy—2-methoxy—7α—methyl—5β,9β,8aβ,6α,10aα—hexahydroanthracen-10(10aH)—one(3-5),1,4-二羟基—3-甲氧基—7-甲基—9,10-蒽醌(3-6),1,4-二羟基—7-甲基—9,10-蒽醌(3-7),1-hydroxy—3-methylanthracene—9,10-dione(3-8),大黄酚(3-9),5,7-二羟基—2-甲基色原酮(3-10),6,7,8,9,10-pentahydroxy—2-methoxy—6-methyl—5,6,7,8-tetrahydro—anthracene-1,4-dione(3-11),6,7,9,10-tetrahydroxy—2-methoxy—6-methyl—5,6,7,8-tetrahydroanthracene-1,4-dione(3-12),7-hydroxy—2,5-dimethyl—4H—chromen—4-one(3-13)。初步药理测试显示,新化合物3-1和已知化合物3-5对口腔癌细胞KB,KBv200及乳腺癌细胞MCF—7不显示明显的细胞毒性,3-11具有抑制六株肿瘤细胞的活性,包括肺癌细胞株A549,肝癌细胞株Hep—2,肝癌细胞株Hep G2,口腔癌细胞株KB,结肠癌细胞株LOVO,乳癌细胞株MCF—7,多药抗药乳癌细胞株MCF—7/Adr,其IC50分别为,2.44μg/ml,3.15μg/ml,4.41μg/ml,3.15μg/ml,3.35μg/ml,4.76μg/ml,5.45μg/ml。本论文还通过NOESY确定了化合物3-5的相对构型。 论文的第4章,研究了南海红树林内生真菌ZH51的次级代谢产物。从培养液的乙酸乙酯提取物中共分离得到4个化合物,其中4-1是一个具有两个三环共轭平面的新化合物,具有非常强的荧光量子效率,且与DNA有较强的作用,有成为与DNA作用药物的可能。1,10-dihydroxydibenzo[b,e]oxepine—6,11-dione(4-2),肉桂酸(4-3),2-甲基—3-羟基—4H—吡喃—4-酮(4-4)。从菌体中分到4个化合物丁二酸(4-5),麦角甾醇(4-6),过氧麦角甾醇(4-7)和环(苯丙—甘)二肽(4-8)。
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