目的:采用三种细胞培养方法,原代培养人恶性间皮瘤(Malignant PleuralMasothelioma,MPM)细胞,探讨其生物学特性,比较三种培养方法之间的差异;建立恶性间皮瘤的小鼠移植瘤模型,分析其病理学特征,为人恶性胸膜间皮瘤的临床研究和药理学分析奠定基础。方法:标本源自昆明医学院第一附属医院胸外科、病理确诊为恶性胸膜间皮瘤的患者。穿刺取得胸水标本和胸膜标本。胸水离心分离肿瘤细胞,进行原代培养。实验分别使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液、含10%胎牛血清的DMEM培养液和含10%胎牛血清的DMEM/F.12(1:1)培养液进行培养。通过光镜、倒置显微镜观察细胞形态;绘制细胞生长曲线;计算倍增时间、分裂指数:建立小鼠皮下移植瘤模型,电镜下观察移植瘤细胞的超微结构,常规病理切片HE染色观察其病理学特点。结果:1.胸水中成功分离出人恶性胸膜间皮瘤细胞,在DMEM/F-12(1:1)完全培养液和DMEM完全培养液中生长良好,传代稳定。胸膜标本中未分离出肿瘤细胞。2.胸水来源实验瘤细胞具有人恶性胸膜间皮瘤的细胞学特征及病理学特征:细胞呈短梭形、类多边形和不规则形,细胞核质比比较大;细胞贴壁能力差,重叠性生长较为明显。3.小鼠皮下移植瘤的病理形态与人恶性胸膜间皮瘤相同的病理学特征:瘤细胞大,不规则形,胞质多,嗜酸性,核圆大且不规则,核分裂象多。结论:1.本实验成功进行人恶性胸膜间皮瘤细胞的原代培养。2.DMEM/F-12(1:1)完全培养液是胸水来源的人恶性胸膜间皮瘤细胞的良好培养基。3.成功建立人恶性胸膜间皮瘤细胞的小鼠皮下移植瘤模型。4.人恶性胸膜间皮瘤细胞小鼠皮下移植瘤模型具有与人恶性胸膜间皮瘤相同的病理学特征。