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近年来,养禽业的发展与规模不断扩大,鸡肠道细菌疾病带来的危害也日益凸显。不仅给养禽业带来重大经济损失,还可通过食源性途径危害人类健康,因此,鸡肠道细菌疾病的防治工作尤为重要。而相比传统的抗菌药物,具有广泛生物活性的牛磺酸,越来越多的应用于家禽养殖业中。加之目前关于牛磺酸对小肠炎症的作用机理还没有阐明,为此,本研究以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导鸡肠道炎症疾病为模型,探究牛磺酸在鸡肠道细菌疾病中的预防作用和保护机制,为牛磺酸用于防治鸡小肠炎症提供理论指导。 1、鸡小肠炎症模型的建立 脂多糖为革兰氏阴性细菌的细胞壁外膜的重要组成成分,也是该类细菌的致病因子之一。脂多糖具有多种生物活性,对宿主有致热性、抗原性等,能够引起宿主特异性免疫产生炎症反应。本研究以一周日龄的海蓝白雏鸡为实验材料,实验分为对照组和LPS处理组(10 mg/kg BW),进行腹腔注射,相同环境下饲养。6h之后,处死雏鸡,剪取十二指肠、空肠和回肠,作为检测分析的材料。临诊症状和解剖结果显示LPS处理之后雏鸡出现腹泻、精神萎靡、食欲下降、扎堆、小肠充血红肿、肝脏有出血点。HE染色、AB-PAS染色、TUNEL染色、PCNA免疫组织化学染色和荧光定量等方法进一步研究LPS对雏鸡小肠的影响。试验结果表明,10 mg/kg BW的LPS可以引起鸡小肠组织中细胞凋亡增多、细胞增殖的能力降低;杯状细胞数量减少、黏蛋白分泌量下降;促炎性因子IL-1β、TNF-α mRNA水平显著升高。以上结果表明,LPS诱导了鸡小肠炎症发生,对小肠黏膜产生了影响。 2、牛磺酸对鸡小肠炎症的预防作用 鸡肠道疾病是危害养禽业及人类健康的重要因素之一,合理有效的防治措施对养禽业具有重大意义。目前,牛磺酸因其具有广泛的生物学功能,作为饲料添加剂逐渐应用于家禽养殖业中,能够有效提高家禽的饲料转化率及生长性能,而关于牛磺酸对家禽肠道疾病方面的研究甚少。为此本试验以海兰白雏鸡为实验材料,探究牛磺酸对于鸡小肠炎症的影响和机制。实验分为对照组、LPS处理组(10 mg/kg BW),LPS+Tau(10 mg/kg BW+60 mg/kg BW)联合处理组和Tau处理组(60 mg/kg BW)。在雏鸡3d时,以灌服的方式饲喂雏鸡牛磺酸溶液一周。在雏鸡10d时,LPS处理组、LPS+Tau联合处理组雏鸡腹腔注射LPS,而对照组、Tau处理组则注射同等体积的生理盐水。在处理后的6h、24h、48h分别处死取材,进行组织形态学、细胞增殖、细胞凋亡、基因表达等方面研究。试验结果表明,LPS处理后能够显著减少细胞的增殖、杯状细胞的数量和黏蛋白的分泌量;同时还促进了小肠组织中的细胞凋亡以及炎性因子IL-1β、TNF-αmRNA的表达;另外,LPS的刺激引起了小肠组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量的显著升高以及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性明显降低。然而在添加了牛磺酸之后,细胞凋亡现象明显减弱,增殖的细胞和杯状细胞的数量、黏蛋白的分泌量增多;IL-1β、TNF-α mRNA的表达水平也明显降低;小肠组织中MDA的含量下降以及SOD活性升高。从而证实了适量的牛磺酸对鸡小肠炎症发生有一定的预防作用。结果提示在生产中,养殖户可以适量添加牛磺酸,预防鸡小肠炎症的发生,增加养殖收益。