右美托咪定在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的保护作用及机制研究

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目的:探讨右美托咪定对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤的保护作用及PI3K/Akt传导通路在其中的作用。方法:30只成年雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和右美托咪定治疗组,每组10只。采用Zivin法建立大鼠脊髓缺血/再灌注损伤模型,对再灌注损伤后6 h、12 h、24h、48 h实验大鼠后肢运动功能进行评分。评分标准:大鼠运动神经功能评分根据Behrmann(1993)5点分级法评价大鼠后肢运动功能。缺血再灌注48 h后取L5部位脊髓前角灰质进行检测,采用抗P-AKT多克隆抗体来进行免疫组化染色,并采用评分量化表评价各实验组P-AKT的表达程度。评分标准为0(无表达)、1(阳性)、2(强阳性)。检测缺血再灌注脊髓前角组织中P-AKT的表达水平。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的带生物素dUTP缺口末端标记(TUNEL)法原位检测再灌注脊髓组织神经元的凋亡指数。以神经元核染色呈黄色或棕黄色即为阳性,以凋亡指数(apoptosis index,AI)作为评定标准。结果:假手术组实验大鼠后肢运动功能正常。模型组和右美托咪定治疗组实验大鼠于缺血再灌注后均出现不同程度的瘫痪。右美托咪定治疗组实验大鼠后肢运动功能的恢复情况要优于模型组,右美托咪定可明显改善脊髓缺血/再灌注损伤后实验大鼠的后肢运动功能(P<0.05)。右美托咪定组P-AKT表达水平明显强于假手术组及模型组,右美托咪定可提高脊髓前角P-AKT的表达水平(P<0.05)。假手术组脊髓组织未见明显神经元凋亡,模型组脊髓组织可见大量凋亡神经元。右美托咪定组凋亡神经元较模型组明显减少,右美托咪定可抑制缺血/再灌注损伤所致的脊髓神经元的凋亡(P<0.05)。结论:右美托咪定对脊髓缺血/再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与激活PI3K/Akt传导通路,从而抑制脊髓神经元的凋亡有关。
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