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近10年来,纳米技术飞速发展。由于金属和半导体纳米粒子具有特殊的光学、电学、磁学和催化活性,并且具有巨大的比表面、尺寸量子效应和化学反应活性,因此纳米粒子在实验中体现出的灵敏度高,选择性好,应用性强等特点,激发了人们广泛的研究兴趣,各种纳米传感器纷纷被建立起来。本丈主要是基于Au纳米在核酸分析中的基本原理,结合其特点,建立新的传感器。
1.综述了纳米技术的进展,介绍了Au纳米的合成方法及其在核酸分析中的原理和应用,阐述了开展DNA纳米探针研究的意义。
2.本丈基于Au纳米的光学特性,研究了小分子与DNA作用方式。通过研究Ru(bipy)<,2>(dppx)<,2+>,Ru(phen)<,2>(dppz)<2+>和Ru(phen)<,3><2+>对DNA融链曲线的影响,根据试剂加入后引起的颜色体系变化,UV-vis光谱,TEM等来研究它们与DNA作用方式。实验显示,Ru(bipy)<,2>(dppx)<,2+>,和Ru(phen)2(dppz)<2+>加入后,增强了DNA的稳定性,修饰在金纳米粒子上互补的寡核苷酸探针的进行杂交,金纳米粒子形成网状纳米结构,体系由红色向蓝色转变,同时波长红移,由522nm红移至600nm,而加入Ru(phen)<,3><2+>对体系没有影响。从而建立识别DNA与目标分子结合方式的新方法。
3.建立了基于三螺旋DNA比色法识别单碱基错配低聚核甘酸。通过设计特定序列 5′-SH-ACA CAC ACA CAC CTT TCT TTC CTT TCT TTC-3′(oligo-1)修饰在Au纳米上,下划线18个破.基设计能够形成三螺旋,另外12个碱基作为臂。实验前,先加入5′-GTG TGT GTG TGT-3′(Oligo-2)序列与臂形成双螺旋,目的是减少Au纳米与oligo-1的物理吸附。当pH为5.6,精胺(H<,2>N(CH<,2>)<,3>NH(CH<,2>)<,4>NH(CH<,2>)<,3>NH<,2>)为4.8μM时,室温(22℃)下加入5′-GAA AGAAAG GAAAGAAAG-3′(Oligo-3),修饰在Au纳米上的oligo-1的下划线部分与Oligo-3形成三螺旋,这引起了纳米粒子间组装,体系由红色变成紫色。实验对其机理进行了研究。如果加进的是单碱基错配或者两个碱基错配时,体系观察不到变化。所以该法可以用来识别碱基错配,方便快捷。