树突状细胞与肝癌细胞杂交瘤苗体内抗肿瘤实验研究

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目的 研制小鼠肝癌H22细胞与脾树突状细胞(DC)融合的杂交瘤苗H22-DC,进而观察H22-DC主动诱导体内特异性抗肿瘤免疫反应以及对H22荷瘤小鼠的治疗作用。 方法 以BALB/C小鼠为实验动物,分离脾DC,采用细胞因子诱导、CDllc磁珠标记、MACS分选等技术与传统的聚乙二醇(PEG)法相结合的方法,将DC与H22细胞相融合制备H22-DC杂交瘤苗。并进行体内致瘤性检测。体内抗肿瘤实验分成免疫保护组和免疫治疗组两大组。免疫保护组随机分成P、H、D和HD4小组,分别用PBS、灭活的H22、DC和H22-DC免疫接种后,再接种H22活细胞;免疫治疗组分成P、D和HD 3小组,分别用PBS、DC和H22-DC对H22荷瘤小鼠进行免疫治疗。以诱发小鼠肿瘤的潜伏期大小、肿瘤生长期、肿瘤发病率以及肿瘤瘤重等为检测指标,探讨杂交瘤苗H22-DC体内对H22的免疫保护和治疗作用,并通过对肿瘤组织的病理学改变结合流式细胞仪检测,进一步探讨肿瘤的死亡模式。 结果1.H22-DC经尾静脉注射入小鼠体内,脾、肺和肝等器官未出现肿瘤病变。2.在免疫保护组,HD组肿瘤潜伏期较P组、H组和D组明显延长(p<0.05),肿瘤大小和肿瘤重量均明显小于P组、H组 汕头大学医学院硕士学位论文 和D组中叱刀5人3.在免疫治疗组,HD组肿瘤大小明显小于P组、 D组巾叼.05人4.肿瘤细胞流式细胞仪检测,HD组亚二倍体峰明显 高于D组和P组。 结论 1.H220C杂交瘤苗无体内致瘤性,安全可靠;2.H220C杂 交瘤苗对H。。细胞的攻击有明显的抵抗作用。H。。-DC治疗荷瘤小鼠也 有一定的作用,而以抵抗肿瘤攻击的免疫保护作用更为显著*.HZ*DC 杀伤肿瘤的模式为诱导H。刀瘤细胞坏死。
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