【摘 要】
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【目的】脑缺血/再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)损伤能导致血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)破坏,使BBB通透性增加,从而引起一系列不良并发症。缓解BBB损伤无疑能减轻I/
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【目的】脑缺血/再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)损伤能导致血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)破坏,使BBB通透性增加,从而引起一系列不良并发症。缓解BBB损伤无疑能减轻I/R损伤,减少神经功能缺失。Hippo/YAP信号通路是近年来首先在果蝇体内发现的一条重要的细胞信号通路,主要参与细胞接触性抑制、调控器官体积大小和生长发育、维持机体细胞增殖凋亡平衡等,对维持生物体稳定具有非常重要的作用,且已被证明能缓解心肌缺血再灌注损伤。但其在I/R损伤中的作用如何,目前尚未见报道,本文的主要目的是探究Hippo/YAP信号通路是否参与I/R损伤的病理生理过程以及能否通过保护BBB缓解I/R损伤。【方法】本研究通过线栓法造成大鼠大脑中动脉阻塞,1.5h后取出线栓造成再灌,构建I/R损伤模型,通过腹腔注射激动剂地塞米松(dexamethasone,DXM)上调Hippo/YAP信号通路关键效应分子YAP和TAZ的表达。研究分两个部分进行:第一部分实验动物分五组:假手术组(sham组),I/R3-h组,I/R6-h组,I/R12-h组和I/R24-h组;第二部分实验动物分四组:sham组,I/R3-h组,I/R3-h+vehicle组和I/R3-h+DXM组。通过Longa评分评估神经功能,干湿重法测定大鼠脑含水量,TTC染色法检测脑梗塞体积,TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Western blot检测目的蛋白含量,艾维斯蓝检测BBB通透性。【结果】研究结果表明,在脑梗塞后24h内,I/R损伤导致Hippo/YAP信号通路的关键效应分子YAP和TAZ表达量明显降低,脑梗塞后3h下降最为显著。I/R3-h+DXM组YAP和TAZ表达上调,同时I/R损伤所致的神经功能缺失减少,脑梗塞体积缩小,紧密连接蛋白表达水平升高,BBB通透性降低,脑水肿减轻和细胞凋亡减少。【结论】Hippo/YAP信号通路在I/R损伤中表达下调,上调Hippo/YAP信号通路对I/R损伤具有神经保护作用,其机制之一可能是缓解缺血缺氧造成的BBB损伤。
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