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1.目的：分离培养脂肪干细胞及对其鉴定 方法：取出大鼠腹股沟区脂肪，建立脂肪干细胞（ADSCs）培养和传代的方法，利用流式细胞术测定细胞表型和细胞周期鉴定，诱导ADSCs定向分化成骨，诱导 ADSCs定向分化成细胞球，并对细胞球进行 Nestin染色，随后，再诱导细胞球7天，进行GFAP、MAP2和β-TubulinⅢ荧光染色来鉴定分化的细胞。 结果：培养出的脂肪干细胞，能够进行增殖和传代。通过流式细胞仪检测的对 ADSCs表型测定，CD29(92.69)％，CD90(92.69)%；CD44(64.41)%；CD45(0.20)%。细胞周期测定，显示细胞大多数处于静止期，具有较强的分裂增殖能力，通过成骨碱性磷酸酶染色（+），证明ADSCs可以诱导转化为骨细胞，Nestin染色（+）、荧光染色GFAP（+）、MAP2（+）和β-TubulinⅢ（+），证明ADSCs可以诱导出NSCs细胞球，并可以分化成NSCs、神经胶质细胞和神经元。 结论：可以成功分离培养ADSCs，并可以使其分化为骨细胞、神经干细胞、星型胶质细胞、神经元。 2.目的：用NGF和BDNF诱导脂肪源性NSCs分化，比较单独和联合应用时对脂肪源性NSCs分化成神经元的差别，同时检测分化过程中相关基因的改变。 方法：将P2代脂肪源性NSCs分为4组：(1)对照组，(2) NGF诱导组，(3) BDNF诱导组，(4)NGF+BDNF联合诱导组。诱导分化7d后，免疫荧光检测各组MAP2和β-TubulinⅢ的细胞阳性率。诱导分化3 d和7 d时间点，细胞RNA被提取，检测各组MASH1，NGN1，NeuroD，HES1和HES5的相对表达量（用Q-PCR方法）。 结果：单独使用NGF或BDNF都可以诱导神经元分化。诱导7 d时，MAP2阳性细胞比例分别为：NGF组为21.23±1.87%，BDNF组为22.48±2.06%；BDNF和NGF组为26.54±3.21%。β-Tubulin III阳性细胞比例分别为：NGF组为26.41±1.52%，BDNF组为32.58±2.37%；BDNF和NGF组为40.32±3.08%。联合诱导组比单独因子诱导组（NGF组或者BDNF组）神经元分化更多。Q-PCR结果示，诱导分化后，发现 MASH1、NeuroD和NGN1表达量都被提升了，联合诱导组比单独因子诱导组（NGF组或BDNF组）表达量高。 结论：联用NGF和BDNF对脂肪源性NSCs分化为神经元有更好的促进作用。 3.目的：探讨不同条件下的细胞移植对AD模型的影响。 方法：分为5组大鼠，Normal group，ADgroup，NGFgroup，BDNFgroup，Combined group。用免疫毒素192-IgG-saporin注射动物，建模后3周，NTF和脂肪源性NSCs诱导培养3d后的混合细胞，被移植到AD动物体内。4周以后，对各组进行水迷宫行为学测试，检测胆碱能神经元数量、海马突触素及AChE阳性纤维密度。 结果：各细胞移植组都改善了 AD模型的行为学指标。联合组的 VDB胆碱能神经元数量84.08±6.48，MS胆碱能神经元数量为32.12±2.57；和单因子NGF或者BDNF比较(P<0.05)。联合组海马CA1区的突触素OD值和AChE阳性纤维数量，分别为0.271±0.013和186.09±2.32；和单因子NGF或者BDNF比较，(P<0.05)。 结论：两个因子（NGF和BDNF）联用诱导脂肪源性NSCs3天后的混合细胞，移植到AD模型，在学习记忆方面，胆碱能神经元数量，海马突触素和AChE阳性纤维数量方面，联合诱导比单因子诱导（NGF或者BDNF）有更好的正性效果。