溶菌酶在异育银鲫和草鱼饲料中的应用研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:yxjdyn
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随着水产集约化养殖的发展,抗生素残留、耐药性等问题已经制约了水产养殖的发展,开发新型安全的饲料添加剂是解决这些问题的一个重要途径。溶菌酶就是新型安全饲料添加剂的一种。本文旨在研究溶菌酶在水产饲料中的应用可能性,并初步确定在异育银鲫和草鱼饲料中的用量范围。本文共三个试验部分,第一章为溶菌酶在异育银鲫饲料中的应用,旨在研究溶菌酶在异育银鲫饲料中应用的可能性,第二章和第三章是在第一章的基础上,将溶菌酶制品优化,验证溶菌酶作为饲料添加剂的稳定性;并研究具备饲料添加剂稳定性的溶菌酶优化制品在草鱼饲料中的应用效果,初步确定溶菌酶在草鱼饲料中的适宜用量。溶菌酶在异育银鲫饲料中的应用研究试验采用单因子试验设计,选用当年异育银鲫,在试验池中用基础饲料养殖40d,使其适应试验条件,并消除试验鱼因营养和环境造成的差异。试验分为11组,每组4个重复,每个重复30尾(初重28.11±2.14g),放入2m×0.75m×1.0m的网箱内养殖,养殖周期60d,研究饲料中添加溶菌酶和其包被品(采用胶体法制备的溶菌酶颗粒)对异育银鲫生长性能、内源酶指标和免疫机能即抗感染能力的影响。溶菌酶组设置6个梯度:0mg/kg(对照组),10mg/kg(L1),20mg/kg(L2),30mg/kg(L3),40mg/kg(L4)和50mg/kg(L5)。溶菌酶包被品组根据初始酶活的理论值将添加量分别设置为:2g/kg (EL1),4g/kg(EL2),6g/kg(EL3),8g/kg (EL4)和10g/kg(EL5)。结果表明:饲料中添加溶菌酶或其包被品对异育银鲫的生长性能有显著影响。包被组相对增重率除EL1组和EL3组比对照组有显著提高(P<0.05),其他组无显著差异;溶菌酶L5组相对增重率比对照组有显著的降低,其他组和对照组无显著差异(P>0.05)。包被组饲料系数EL1、EL2组和EL3组比对照组有显著降低,EL5组比对照组有显著的升高(P<0.05),呈现出随包被品浓度的增加先降低再升高的趋势;溶菌酶除L5组比对照组有显著的提高(P<0.05),其他组和对照组无显著差异(P>0.05)。在相同的酶活力条件下,包被组试验鱼的生长性能普遍优于溶菌酶组。攻毒结果说明,饲料中添加溶菌酶和其包被品可增强异育银鲫对嗜水气单胞菌的抗感染能力,提高异育银鲫的非特异性免疫功能。对内源酶的影响溶菌酶组和溶菌酶包被品组的趋势基本一致。综合生长和免疫性能两方面,包被品组表现出更多的优势,在本试验条件下,溶菌酶包被品在异育银鲫饲料中的适宜添加量为2-6g/kg。鉴于第一章试验中包被品对异育银鲫生长性能和免疫性能的影响均优于未经处理的溶菌酶,而由于凝胶法制备的包被品的颗粒较大,且酶活力的稳定性较差,故对溶菌酶包被工艺进行优化,采用薄膜法进行包被制作成近似粉状的溶菌酶制品,并对其性质和应用作出如下研究。采用薄膜法制备的溶菌酶制品的稳定性研究,共设计了四个方面的试验:溶菌酶性质试验,饲料加工环境模拟试验,体外消化试验和储存试验。溶菌酶性质试验通过设置不同温度条件和pH条件测定溶菌酶制剂的酶活变化。试验结果表明,该溶菌酶制剂的最适温度为80℃左右,而pH值在3.0-8.0之间对溶菌酶的酶活影响不显著(P>0.05)。通过挤压和高温处理模拟饲料加工环境,研究其对溶菌酶酶活的影响。试验结果表明,挤压和高温处理对溶菌酶饲料的酶活力影响不显著(P>0.05)。体外消化试验研究溶菌酶草鱼、鲤鱼和鲫鱼消化道粗酶液作用下的酶活变化情况。结果表明,鱼类消化道所分泌的消化酶对溶菌酶制品活力的影响因消化道位置不同而不同,总体看来在中肠处溶菌酶活力损失最大。消化酶对溶菌酶制品活力的影响也与鱼的种类有关,相比较而言,草鱼消化道对该溶菌酶制品的分解能力较强。溶菌酶饲料的储存试验表明,随着保存时间的延长,饲料中的溶菌酶活力逐渐降低。200-400mg/kg组在30d后较为稳定;100mg/kg组储存试验中呈现折线下降;500mg/kg组呈现持续下降的趋势。优化后的溶菌酶制品在草鱼饲料中的应用研究试验采用单因子试验设计,选用当年草鱼夏花,放于试验池中用基础饲料养殖30d,使其适应试验条件,并消除试验鱼因营养和环境造成的差异。在基础饲料中分别添加溶菌酶制品0(对照)、100、200、300、400和500mg/kg,每组设置5个重复,饲喂草鱼(6.93±0.27g)60d。通过生长性能和抗感染能力两个方面研究溶菌酶的效果,并确定适宜用量。试验结果表明,试验45天时,试验组的草鱼特定生长率显著低于对照组,60天时,100-300mg/kg组的草鱼特定生长率与对照组差异不显著,400mg/kg组和500mg/kg组显著低于对照组(P<0.05)。饲料中溶菌酶含量对草鱼的饲料系数的影响呈现先降低再升高的趋势,200mg/kg组饲料系数最低。通过腹腔注射的方法对草鱼进行嗜水气单胞菌攻毒,结果表明,200-500mg/kg组的草鱼死亡率显著低于对照组和100mg/kg组(P<0.05)。饲用溶菌酶对草鱼内源免疫酶活性和内源消化酶活性有一定的刺激作用。抑菌试验表明,该溶菌酶制品对常见革兰氏阴性菌嗜水气单孢菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌有明显的抑菌作用。综合草鱼的生长性能和抗感染能力,认为本试验条件下溶菌酶制品在草鱼饲料中的适宜添加量为200-300mg/kg。
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