【摘 要】
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基因治疗(Gene therapy)是将外源性遗传物质输送到靶细胞,以改善由于基因缺陷和变异引起的疾病,达到治疗目的.基因治疗中的关键问题主要是基因的输送和基因进入细胞后的表达
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基因治疗(Gene therapy)是将外源性遗传物质输送到靶细胞,以改善由于基因缺陷和变异引起的疾病,达到治疗目的.基因治疗中的关键问题主要是基因的输送和基因进入细胞后的表达调控.目前,在基因输送方面,主要分为病毒载体和非病毒载体两大类.在调控基因的表达上,大多在基因的转录水平上进行调控,利用一些受物理或化学因素诱导的启动子元件构建出受这些理化因素诱导的真核表达载体,从而实现对基因表达的调控.对于热诱导的基因表达,我们主要研究了加热诱导后,基因表达随时间变化的过程,在细胞实验中,基因表达在热诱导后8小时内达到最大值,基因诱导倍数在100倍以上,之后三天内便可以降至较低的水平.体内实验也与此相似,在加热后的24小时内,基因表达达到最大值,之后三天内降至背景表达的水平.我们还比较了39oC和41oC加热条件下,在体基因表达的情况.更为重要的是,在体内实验中,我们尝试了在第一次诱导基因表达后,再次诱导基因表达.结果显示热诱导的基因在第一次被诱导表达后,可以再次被诱导表达,从而在时间上实现了对基因表达的调控.另外,我们自行搭建了一套聚焦超声加热系统用于在体的基因诱导.超声加热的优点就在于它可以三维聚焦于肌体的局部,减少对其它正常组织的损伤.在实验中,外源基因只在超声聚焦的部位表达,从在空间上实现了对基因表达的控制.
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