植物文殊兰(拉丁学名:Crinum asiaticum)是石蒜科属文殊兰草本植物,花瓣白色,有淡淡清香。植物文殊兰含有挥发油类、生物碱类、黄酮类、多糖类脂肪酸类等多种化学成分。其跟叶可入药。对抗菌抗炎、抗拟胆碱样、治疗心脑血管疾病有丰富的药理作用。目前,关于文殊兰叶片中挥发类成分的研究较少,对其抗肿瘤作用尚未深入研究。本课题选用干燥文殊兰叶片,提取其挥发类成分,测定其含量及主要有效物质,通过提取分离以及气质联用等分析手段对其挥发类成分进行研究。旨在为研究文殊兰抗肿瘤的进一步研发提供有效的科学依据。本课题选用水蒸气蒸馏法、萃取法、蒸馏萃取法三种方法提取文殊兰干燥叶片中的挥发类成分。通过正交试验可知最佳提取工艺为选用浸泡时间为120min,提取温度为70℃,提取时间6小时筛选出最佳提取工艺---萃取法。比较三种提取方法所得提取率分别为:0.55%、0.95%、0.72%。运用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)筛选出最佳升温条件为色谱柱初温设置75℃,该温度下恒定1.5 min后每分钟升高5℃至100℃,该温度下恒定0.5 min后每分钟升高15℃至130℃,该温度下恒定4 min后每分钟升高5℃至至160℃,该温度下恒定10 min后每分钟升高至220℃。该温度下恒定15 min分钟。经检测水蒸气蒸馏法和蒸馏萃取法分别获得15种和14种成分,萃取法所得挥发油中含18中成分,根据检测成分含量发现三种方法所提出的挥发油中都能检测到主要成分-亚油酸,故对亚油酸的抗肿瘤活性进行进一步筛选研究。采用CCK-8法,检测文殊兰中总挥发油成分对肿瘤细胞的增殖抑制作用,运用五种给药浓度进行实验,运用SPSS正交试验计算其半数致死量,证明文殊兰中总挥发油对HepG-2细胞有增殖抑制作用,鉴于总挥发油中亚油酸成分最高,推测亚油酸对肝癌HepG-2细胞有增殖抑制作用,随后取亚油酸进行重复实验,确定亚油酸对HepG-2同样具有增殖抑制作用,呈线性关系,随浓度增高而增强。运用倒置显微镜和荧光显微镜对给药细胞进行形态学观察,发现给药后的细胞形状发生改变,凋亡小体增多,细胞边缘出现褶皱,发泡现象,浓度越大凋亡现象越明显,说明亚油酸对HepG-2细胞同样具增殖抑制作用。最后运用流式细胞仪检测给药细胞的凋亡率,阳性组凋亡率为(48.503±0.09)%,空白组凋亡率为(1.099±0.15)%,高浓度组凋亡率为(36.155±0.02)%,中浓度组凋亡率为(22.525±0.12)%,低浓度组凋亡率为(18.433±0.11)%。研究文殊兰叶片中挥发类成分发现,文殊兰叶片中挥发类成分对肿瘤细胞具有增殖抑制作用。其含有的亚油酸成分可能为其抗肿瘤作用的主要成分。