研究背景 脊髓损伤后很难再生修复，有两方面的原因，一是因为局部抑制分子抑制神经再生的作用，另一方面是因为成年哺乳动物脊髓本身的再生能力不够。然而无论是应用抗体阻断，还是用免疫封闭，或是用基因敲除的方法去除抑制分子的作用，仍然不能达到有效的脊髓功能修复，修复脊髓损伤还需要从提高脊髓自身的内在的生长潜能着手。作为第二信使的cAMP，在离体和在体条件下都表现出较好的刺激神经元突起生长和神经轴突再生的作用，并且介导神经营养因子促进神经生长的作用，胞内cAMP水平调控着神经元在发育过程中轴突再生能力的逐渐丧失，因此，人们提出cAMP能够提高脊髓的内在的生长能力，这种作用是通过细胞信号传导的作用实现的。 动物脊髓损伤后的后肢运动功能自发性恢复是一种普遍现象，BBB评分系统是最有代表性和最广泛应用的评估脊髓损伤修复效果的评价方法，然而在这个评分系统中没有区别后肢运动是自发的或是自主的，判别并排除脊髓损伤后后肢运动功能中的自发性运动恢复，将使BBB评分更准确地反应修复策略的效果，为脊髓损伤研究提供更加可靠的科学依据。 目的 1、探讨在体内给入cAMP是否有良好的脊髓损伤修复效果。 2、观察脊髓损伤后的自发性后肢运动功能恢复的水平。 方法 1、采用56只大鼠脊髓背侧半横切断伤模型，分别在蛛网膜下腔和在脊髓损伤局部连续给入cAMP、在大脑运动皮层一次给入cAMP，通过免疫组化染色的第一军医大学博!学位论文 方法，观察损伤局部神经丝的表达和分布:通过皮质脊髓束和脊髓顺行追踪， 观察皮质脊髓束和脊髓神经纤维的再生与分布:通过BBB评分明确后肢运动 功能恢复的程度，并以此来评价治疗措施的脊髓损伤修复效果。、采用不同损伤程度的大鼠脊髓损伤模型，观察后肢运动情况并进行BBB评 分，明确大鼠脊髓损伤后后肢运动功能自发性恢复的规律，来进一步探讨脊 髓损伤与BBB评分之间的关系。 结果1、在蛛网膜下腔连续给入cAMP时，尽管CAMP组比对照组在损伤区域有较多的 NF分布，在损伤区吻侧有较多的阳性标记的皮质脊髓束神经纤维，但并没 有明显的脊髓再生，两组动物的后肢运动BBB评分的时间曲线没有明显的差 别。2、在损伤区局部连续给入cAMP时，cAMP组比对照组在损伤区域有较多的NF 分布。在损伤区内有大量的脊髓神经纤维再生，包括少量的皮质脊髓束神经 轴突再生。没有长的连续的再生纤维穿过损伤区瘫痕组织到达尾端。损伤区 和尾侧正常区域的NF没有连接再通，两者之间界限仍然明显。cAMP组和对 照组动物的后肢运动功能BBB评分的时间曲线没有明显的差别。3、在大脑运动皮层给入cAMP时，cAMP组比对照组在损伤区域有较多较好的NF 分布。在损伤区内有较多的皮质脊髓束神经轴突再生，再生纤维沿空洞边缘 延伸绕过空洞。在损伤区内还有较多的脊髓腹侧纤维向背侧尾端再生。尽管 cAMP组后肢运动BBB评分高于对照组，但统计分析显示两者间差别并不明 显。4、胸髓T10背侧半切断组动物在术后4一5周基本恢复正常行走，BBB评分达 到20或21。T10以下脊髓全切除组动物后肢运动功能BBB评分始终维持在 O。胸髓T10全切断和TIO全切除组动物的后肢运动BBB评分在各个时间的 评分都非常接近，在术后两周达到了8，并且在以后的时f司里维持在8的水第一军医人学博卜学位论文平不再增加。比较后肢运动功能BBB评分的时间曲线，在T10全切断和T10全切除组之间差别不明显，其余各组间差别显著(P=0.000)。在胸髓T10全切断和T10全切除组，BDA脊髓顺行追踪显示在损伤区和损伤区尾侧无BDA标记纤维，在损伤区几乎没有NF分布，没有连续的NF阳性标记通过损伤区，T10全切断组荧光金逆行脊髓追踪显示荧光金终止于损伤区尾侧，损伤区和损伤区吻侧无任何荧光金分布。 结论l、在蛛网膜下腔连续给入cAMP不能诱导有效的神经再生。2、在损伤区局部连续给入cAMP可诱导损伤区局部大量的神经再生，包括少量 的皮质脊髓束神经轴突再生，但不能促进后肢运动功能的恢复。3、在大脑运动皮层给入cAMP导致损伤区内较多的皮质脊髓束神经轴突再生， 并诱导一些脊髓腹侧纤维向背侧尾端再生，也不能促进后肢运动功能恢复。4、脊髓T10全切断大鼠的自发性后肢运动功能恢复可达到并维持在BBB评分8 的水平。