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目的:脑梗死(Cerbral Infarction,CI)是我国人群中的一种常见病、多发病,其致残率、致死率均较高,且近年来该病发病年龄年轻化趋势日渐明显。通常认为脑梗死是由多种危险因素引发,如高血压、高血脂、糖尿病、心脏病、吸烟、酗酒等等,通过对这些危险因素的控制,可延缓和降低脑梗死的发生。但在临床实践中我们却经常发现许多人即使同时具备上述多种危险因素却未发生脑梗死,而一些不存在危险因素的人却发生了脑梗死,这从一个方面说明脑梗死的发生可能与遗传因素具有一定的关系。有研究表明有脑梗死阳性家族史者较同年龄、同性别的阴性家族史者更易患脑梗死。随着分子生物学的发展和对脑梗死研究的深入,国内外许多学者均认为脑梗死是一种多种因素共同作用的遗传性疾病。近年来对脑梗死患病易感基因及其多态性的研究成为脑梗死研究的重点和热点。其中炎症细胞因子在脑梗死发病中的作用受到越来越多的重视。国内外大量动物及体内外实验均发现,炎症反应在动脉粥样硬化、脑梗死、缺血-再灌注损伤等的发生、发展过程中起着重要的作用。参与这些炎症反应的常见细胞因子有肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素(IFN)、转化生长因子(TGF)等等。其中IL-1、TNF等被认为是主要的促炎症反应细胞因子,而IL-4、IL-10为抗炎症反应细胞因子。且研究表明TNF、IL-1、IL-4、IL-10等均具有基因多态性。本实验主要选取一定数量的脑梗死患者及正常人群,通过应用特异性较高的PCR方法对炎症因子IL-1、IL-4基因多态性进行分析,以研究这些炎症细胞因子的基因多态性与脑梗死之间的相关性,为找到脑梗死的遗传危险因子寻找更多证据,并为基因诊断在脑梗死疾病中的应用进行初步探索。方法:1选取82例“脑梗死”患者作为病例研究组(CI组),并记录其有无高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟及饮酒病史。同时随机选取同期来我院体检的健康人群82人做为正常对照组(正常组)。2对入选对象抽取清晨空腹外周静脉血3ml(EDTA抗凝),用DNA基因提取试剂盒提取DNA基因。3参考文献报道,采用聚合酶链反应(polymerase chain reation,PCR)对目的基因片段进行扩增,经电泳证实PCR产物。4利用特异性内切酶对扩增片段进行切割,即限制性片段长度多态性分析法(restriction fragment length polymorphism,RFLP )对入选对象进行IL-1α-889C/T、IL-1β+3953C/T、IL-1β-511C/T、IL-4-590C/T、IL-4+33C/T基因位点进行多态性检测分析。电泳观察记录酶切结果。5随机选取部分标本送检进行测序以验证酶切结果。6相关分析:首先各组研究对象的基因型分布经过Hardy-Weinberg平衡检验证明其有群体代表性。然后应用统计分析软件进行统计学分析,各因子基因型及其等位基因数均采用直接计数法并计算其基因频率,组间资料比较用x2检验,分析所研究的各个因子的基因多态性与脑梗死的发生是否具有相关关系。再经过Logistic回归分析校正其它常见有意义的脑梗死危险因素,以确定所研究的细胞因子基因多态性是否为脑梗死的独立危险因素。结果:1经Hardy-Weinberg平衡检验证实所选各组研究对象基因型分布均具有群体代表性(P>0.05)。2 CI组IL-lα(-889C/T)CC、CT、TT三种基因型分布频率分别为56.10%、31.71%、12.20%,正常组三种基因型分布频率分别为82.93%、14.63%、2.44%,两组比较IL-lα(-889C/T)基因型分布具有统计学差异(χ2 =14.737,P=0.001<0.05)。CI组C、T等位基因分布频率为71.95%、28.05%,正常组C、T等位基因分布频率为90.24%、9.76%,两组比较C、T等位基因分布频率有统计学差异(χ2 =17.900,P=0. 000<0.05)。3 CI组IL-lβ(+3953C/T)、IL-lβ(-511C/T)基因型分布及等位基因频率与正常对照组比较无统计学差异(P>0.05)。4 IL-4(-590C/T)、IL-4(+33C/T)基因型分布及等位基因频率在脑梗死与正常对照组间分布无统计学差异(P>0.05)。5将脑梗死常见危险因素:高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟、饮酒以及IL-lα(-889C/T)的CC、CT、TT基因型纳入Logistic回归方程发现所研究的IL-lα-889基因TT型等位基因及高血压、吸烟均与脑梗死的患病具有一定的相关性。结论:1脑梗死可能是多种因素共同作用的复杂的遗传性疾病。2 IL-Iα(-889C/T)基因多态性与石家庄地区人群脑梗死的易患性可能具有一定的相关性,携带IL-lα(-889C/T)TT基因型可能增加人群对脑梗死的易患性。3 IL-lβ(+3953C/T)、IL-lβ(-511C/T)基因多态性可能与石家庄地区人群脑梗死遗传易感性不具相关性。4 IL-4(-590C/T)及IL-4(+33C/T)基因多态性可能与石家庄地区人群脑梗死遗传易感性无相关关系。