结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)编码的哺乳动物细胞进入(Mammalian cell entry,mce)蛋白在细菌入侵宿主细胞的过程中起重要作。Mtb中含有4个mce操纵子,mcelF属于mce基因24个家族成员之一,蛋白序列预测其编码细胞壁蛋白,但实际功能还未知。为了研究mcelF蛋白在Mtb感染过程中的具体功能作用机制,我们构建了 mcelF过表达的耻垢分枝杆菌,发现过表达mcelF的耻垢分枝杆菌感染小鼠RAW264.7细胞,能够抑制RAW264.7细胞中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α及iNOS的产生。更进一步,我们发现过表达mcelF的耻垢分枝杆菌感染WT和TLR2敲除小鼠来源的BMDM,能够抑制细胞炎性因子及iNOS的表达,而感染TLR4敲除小鼠BMDM,其细胞炎性因子和iNOS的表达没有太大变化。过表达mcelF的耻垢分枝杆菌感染小鼠RAW264.7细胞,NF-κB信号通路中IKKα、IκB、p65及JNK的磷酸化显著受到抑制。我们同时构建了 mcelF上调表达稳转巨噬细胞系,用TLR2激动剂(Pam3CSK4)和TLR4激动剂(LPS)激活,发现LPS激活的TLR4下游信号通路被明显抑制,而Pam3CSK4激活的TLR2下游信号通路没有明显的变化。和过表达mcelF的耻垢分枝杆菌感染类似,在RAW264.7中过表达mcelF能够抑制LPS激活的TLR4下游信号通路。小鼠体内实验表明,过表达mcelF的耻垢分枝杆菌感染能够抑制WT、TLR2敲除小鼠BMDM中NF-κB信号通路相关蛋白的表达。利用纯化的mcel F蛋白刺激RAW264.7细胞,发现其与过表达mcelF耻垢分枝杆菌一样,能够抑制p65的磷酸化及iNOS的表达。以上研究结果表明,结核分枝杆菌mcelF蛋白能够通过抑制TLR4信号通路中相关信号蛋白的表达来抑制细胞炎性因子及iNOS的表达,从而促进Mtb在宿主中的生存。