论文部分内容阅读
背景和目的膀胱移行细胞癌是泌尿外科常见的肿瘤，随着人均寿命延长，工农业生产发展所致环境污染，膀胱癌的发病率有增加趋势。在世界范围内其发病居泌尿外科肿瘤的第二位，而在我国其发病率及死亡率占泌尿外科肿瘤首位。其主要病理特点为多发性及易复发性，因此给家庭和社会带来了沉重的经济负担和精神压力。为了探讨其发病机制以及治疗方法，人们对由基因引起细胞程序化死亡调节的理论即细胞凋亡理论做了重点研究。凋亡抑制基因对细胞程序化死亡的调节是促进细胞增殖而抑制其死亡，从而成为肿瘤形成的一个重要的分子生物学机制。Survivin基因是迄今发现最强的凋亡抑制基因之一。它能抑制细胞的凋亡，促进细胞的增殖，参与调节细胞的有丝分裂，并可参与血管生成。为了解Survivin基因在膀胱癌中的表达及其与膀胱癌的发生、发展和预后等多方面的关系，本文采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked-inmunosorbentassay，ELISA)、逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术和免疫组织化学SP法检测尿中Survivin蛋白的含量，脱落细胞中Survivin mRNA的含量、膀胱癌组织及正常膀胱组织中Survivin蛋白的表达水平，探讨Survivin基因与肿瘤的发生、发展和预后等方面的关系，为膀胱癌的基因诊断及基因治疗提供新的途径和理论依据。方法1、收集临床病例材料和正常对照组材料。取患者尿液和肿瘤组织标本，取健康志愿者尿液和正常膀胱粘膜组织标本。2、尿中Survivin蛋白的测定：采用酶联免疫吸附测定方法对患者和健康对照人群尿液中Survivin蛋白进行测定，并进行数据采集和分析。3、尿脱落细胞Survivin mRNA检测：采用RT-PCR方法对患者和健康对照人群尿脱落细胞进行Survivin mRNA检测，并计算其阳性表达率。4、组织中Survivin蛋白的免疫组织化学检测：采用免疫组织化学SP法检测患者肿瘤组织和正常对照粘膜组织内Survivin蛋白表达情况，并计算阳性率。结果1、尿中Survivin蛋白测定结果：膀胱移行细胞癌患者组尿Survivin蛋白含量明显高于健康对照组。尿Survivin浓度的高低随疾病临床和病理分期的增加而增加。2、尿脱落细胞Survivin mRNA检测结果：膀胱移行细胞癌患者组尿脱落细胞Survivin mRNA阳性率明显高于正常对照组，且阳性率和病情严重程度呈正相关。3、组织中Survivin蛋白的免疫组织化学检测：光镜下Survivin阳性表达是细胞浆内染成深棕色，伴有胞核染色，低倍和高倍镜下与背景区分明确。膀胱移行细胞癌患者组Survivin蛋白阳性率明显高于正常膀胱粘膜对照组。结论1、用RT-PCR法检测尿脱落细胞Survivin mRNA表达，诊断BTCC敏感性、特异性高，又无创伤性，因此检测尿脱落细胞中的Survivin mRNA可作为BTCC的一个辅助诊断方法。2、Survivin在正常膀胱粘膜上皮中不表达，但在膀胱移行细胞癌中呈高表达，提示Survivin的表达水平升高可考虑用于膀胱移行细胞癌的辅助诊断。3、随着膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期的增高，Survivin的表达水平升高，提示Survivin的表达水平与膀胱移行细胞癌的恶性程度呈正相关，与膀胱移行细胞癌的形成及癌细胞的增殖密切相关，Survivin的表达水平可考虑在临床上用于判断膀胱移行细胞癌患者肿瘤侵袭性的严重程度。